[发明专利]高粱花叶病毒间接ELISA检测方法及其试剂盒与应用

摘要

本发明公开了一种甘蔗中的高粱花叶病毒间接ELISA检测试剂盒，主要包括特异性识别高粱花叶病毒的兔抗多克隆抗体和辣根过氧化酶标记的羊抗兔lgG标准液。其中，多克隆抗体以甘蔗高粱花叶病毒的P3蛋白N端保守区多肽为抗原制备。据此，发明人还建立了相应的间接ELISA检测方法，并将之用于甘蔗中的高粱花叶病毒检测。与现有技术相比，本发明具有灵敏度高、特异性强、成本低、高通量、检测快速的优点，既适用于田间对少量样品的快速检测，也适用于实验室内的大量样品的高通量快速检测。

主权项

1.一种高粱花叶病毒间接ELISA检测试剂盒，其特征在于包括特异性识别高粱花叶病毒的兔抗多克隆抗体和辣根过氧化酶标记的羊抗兔lgG标准液；所述多克隆抗体以甘蔗高粱花叶病毒的P3蛋白N端保守区多肽为抗原制备；所述制备按以下操作进行：从NCBI网站获得SrMV的P3基因序列，预测P3蛋白的氨基酸序列，选取N端暴露于天然蛋白外表的多肽为抗原，合成该多肽，将此多肽与弗氏佐剂混合免疫兔子，采集兔子血液，经亲和层析纯化获得多克隆抗体；所述多肽为序列表SEQ.ID.No.1的氨基酸序列。