[发明专利]一种3D培养自体脂肪MSCs来源的神经前体细胞的方法有效
申请号: | 201710509371.6 | 申请日: | 2017-06-28 |
公开(公告)号: | CN107164326B | 公开(公告)日: | 2020-04-10 |
发明(设计)人: | 张洪钿;苑春慧 | 申请(专利权)人: | 北京再生生物科技研究院有限公司 |
主分类号: | C12N5/079 | 分类号: | C12N5/079 |
代理公司: | 北京纽乐康知识产权代理事务所(普通合伙) 11210 | 代理人: | 黄敏华 |
地址: | 100085 北京市海淀*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明公开了一种3D培养自体脂肪MSCs来源的神经前体细胞的方法,包括如下步骤:S1.制备胶原3D支架;S2.采集脂肪组织,分离脂肪细胞,以MSCs培养基培养收获P0代MSCs,P0代MSCs以MSCs培养基重悬,培养收获P1代MSCs;S3.预处理胶原3D支架;S4.以MSCs培养基重悬P1代MSCs,接种至含胶原3D支架的组织培养皿中,使用NPCs培养基继续培养6天,收获NPCs。本发明的有益效果:通过采用层黏连蛋白和玻连蛋白包被胶原海绵构建胶原3D支架,能促进MSCs粘附,抑制其神经元分化。然后以MSCs培养基预处理胶原3D支架,防止MSCs粘附过程中成团,最大程度保证单细胞粘附。采集腹部脂肪分离、扩增MSCs,采用胶原3D支架培养NPCs,能获得的NPCs,能够满足自体脂肪MSCs来源NPCs的纯度和制备需求。 | ||
搜索关键词: | 一种 培养 脂肪 mscs 来源 神经 体细胞 方法 | ||
【主权项】:
一种3D培养自体脂肪MSCs来源的神经前体细胞的方法,其特征在于,包括如下步骤:S1.制备胶原3D支架;S2.采集脂肪组织,分离脂肪细胞,以MSCs培养基培养收获P0代MSCs,P0代MSCs以MSCs培养基重悬,培养收获P1代MSCs;S3.预处理胶原3D支架;S4.以MSCs培养基重悬P1代MSCs,接种至含胶原3D支架的组织培养皿中,使用NPCs培养基继续培养6天,收获NPCs。
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