[发明专利]一种环境化学品对大鼠甲状腺系统影响的测定方法

摘要

本发明公开了一种环境化学品对大鼠甲状腺系统影响的评估方法。该方法通过化学品对大鼠的暴露，利用酶联免疫吸附试验实现对血浆甲状腺激素水平的快速分析，并利用特异性、高灵敏的荧光实时定量PCR方法实现对甲状腺相关基因表达水平的相对定量分析。通过分析血浆甲状腺激素水平的变化以及与甲状腺激素合成、转运、代谢和功能发挥密切相关的基因表达水平的变化，基于分子生物学构建了一种环境化学品甲状腺干扰效应评估的方法。该方法能够系统的分析环境化学品对大鼠甲状腺系统的影响，具有获得信息全面、重复性好、特异性强等优点。

主权项

一种环境化学品对大鼠甲状腺系统影响的测定方法，其特征在于：包括以下步骤：(a)试验组：环境化学品经口每天暴露大鼠7‑28天后，收集血液及甲状腺、肝脏样品；以未经环境化学品暴露大鼠血液及甲状腺、肝脏样品为对照组；(b)对步骤(a)所得到血液样品进行预处理，利用酶联免疫吸附实验对血液样品中的甲状腺激素进行定量分析，计算各组数据平均值；将试验组与对照组的数据平均值进行T检验比较，若P值小于0.05且试验组数据平均值大于对照组数据平均值，说明该每天暴露量的环境化学品暴露升高了甲状腺激素水平，引起甲亢；若P值小于0.05且试验组数据平均值小于对照组数据平均值，说明该每天暴露量的环境化学品暴露降低了甲状腺激素水平，引起甲减；若不满足上述条件，说明该每天暴露量的环境化学品暴露未对甲状腺激素水平产生影响；(c)对步骤(a)所得到的甲状腺、肝脏样品分别进行预处理，利用荧光实时定量PCR实验对甲状腺、肝脏样品中的甲状腺激素相关基因表达水平分别进行定量分析，计算各组数据平均值，将试验组与对照组的数据平均值进行T检验比较，并计算试验组数据平均值÷对照组数据平均值；若P<0.05且试验组数据平均值÷对照组数据平均值>2表明该暴露量的环境化学品显著升高了该基因表达水平；若P<0.05且试验组数据平均值÷对照组数据平均值<0.5表明该暴露量的环境化学品显著降低了该基因表达水平；若不满足上述条件，则表明该暴露量的环境化学品未对该基因表达水平产生影响。