[发明专利]一种温度可控基于酶催化的电化学DNA传感器及其制备方法有效

专利信息
申请号: 201710474588.8 申请日: 2017-06-21
公开(公告)号: CN107144619B 公开(公告)日: 2019-12-17
发明(设计)人: 吴韶华;汤优;张标;王芳芳;孙建军 申请(专利权)人: 福州大学
主分类号: G01N27/327 分类号: G01N27/327
代理公司: 35100 福州元创专利商标代理有限公司 代理人: 蔡学俊
地址: 350108 福建省福州市*** 国省代码: 福建;35
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摘要: 发明公开了一种温度可控的基于辣根过氧化物酶电催化的电化学DNA传感器及其制备方法,其包括金盘热电极,巯基化单链DNA探针CP、目标DNA、标记了生物素的信号探针SP和标记了链霉亲和素的辣根过氧化氢酶。将一段巯基化的单链DNA固定在金盘热电极表面作为捕获探针CP,目标DNA一端与CP互补另一端与末端标记生物素的信号探针SP互补,形成一个三明治结构,SP上标记的生物素与耦合了辣根过氧化氢酶的链霉亲和素特异性结合,将辣根过氧化氢酶固定在电极表面,利用其催化还原过氧化氢将对苯酚氧化为对苯醌,其后在电极表面还原成对苯酚。本发明提供的检测方法对DNA的检测具有成本低廉,检测灵敏度高的特点。
搜索关键词: 一种 温度 可控 基于 催化 电化学 dna 传感器 及其 制备 方法
【主权项】:
1.一种温度可控基于酶催化的电化学DNA传感器在检测DNA中的应用,其特征在于,检测过程如下:将上述电化学传感器与银氯化银参与电极和铂丝对比电极构成三电极系统,在通氮除氧及加入1 mM 对苯二酚和1mM过氧化氢的PBS缓冲液中进行方波伏安检测,得到响应电流与目标DNA浓度的对数呈线性关系,实现对目标DNA的灵敏检测;所述PBS缓冲液浓度为0.1M,其pH为7.2~7.6;电极温度为40℃;/n所述电化学DNA传感器制备方法,包括以下步骤:/n(1)设计一条捕获探针DNA链CP,目标DNA链TP一端能与所述捕获探针DNA链CP互补,另一端与信号探针SP互补;CP的5’端巯基化;SP链3’端标记有生物素;捕获探针CP的DNA序列为:5’-SH-(CH
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