[发明专利]一种检测BRCA1和BRCA2基因变异的检测引物、试剂盒及方法

摘要

本发明公开了一种检测BRCA1和BRCA2基因变异的检测引物、试剂盒及方法，涉及生物检测领域，包括用于富集BRCA1和BRCA2基因所有外显子和外显子侧翼的内含子区域的富集引物组合；以及用于标记BRCA1和BRCA2基因的各个外显子所在区域的特征片段的标记引物组合；所述富集引物组合利用五个富集引物组，就实现了待测样品中的BRCA1和BRCA2基因目标区域的100％富集，测序后即可获得序列突变信息；所述标记引物组合利用五个标记引物组实现了BRCA1和BRCA2基因的所有外显子所在区域的特征片段的扩增，通过判断特征片段的大小和峰高，判断各外显子在基因组中的拷贝数和相应区域的大片段重组情况。本发明所提供的检测方法具有操作简单，成本低廉的优点。

主权项

1.一种检测BRCA1和BRCA2基因变异的检测引物，其特征在于，所述检测引物包括：用于富集BRCA1和BRCA2基因所有外显子和外显子侧翼的内含子区域的富集引物组合；以及用于标记BRCA1和BRCA2基因的各个外显子所在区域的特征片段的标记引物组合；其中，所述富集引物组合从其扩增区段包含BRCA1和BRCA2基因所有外显子和外显子侧翼的内含子区域的多对富集引物中得到的五个富集引物组；其中，所述五个富集引物组是根据所述多对富集引物对BRCA1和BRCA2基因进行扩增得到的扩增片段的大小进行分组得到的，以便将PCR反应数降低到5个；其中，在对待测样品中的BRCA1和BRCA2基因进行扩增时，利用所述5个富集引物组中的每个富集引物组分别对待测样品中的BRCA1和BRCA2基因进行多重PCR处理，得到五组的扩增产物，实现待测样品中的BRCA1和BRCA2基因目标区域的100％富集；其中，所述标记引物组合包括从其扩增区段包含BRCA1和BRCA2基因的各个外显子所在区域的一段序列的多对引物中获得五个标记引物组；其中，所述五个标记引物组是根据混合所述多对引物对BRCA1和BRCA2基因进行多重PCR扩增，并根据扩增的对应于BRCA1和BRCA2基因的各个外显子的不同长度的扩增子进行分组得到的；其中，所述五个引物组中，每个引物组中的每个引物所扩增的扩增子长度均不相同，且每个扩增子均对应BRCA1和BRCA2基因上的至少一个外显子区域，从而通过检测扩增子的峰高即可获得BRCA1和BRCA2基因大片段重组的信息。