[发明专利]煤层气田地下水微生物检测方法在审
| 申请号： | 201710408122.8 | 申请日： | 2017-06-02 |
| 公开（公告）号： | CN107099604A | 公开（公告）日： | 2017-08-29 |
| 发明（设计）人： | 王玉成 | 申请（专利权）人： | 湖南省硕远检测技术有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/04 |
| 代理公司： | 北京众合诚成知识产权代理有限公司11246 | 代理人： | 夏艳 |
| 地址： | 423000 湖南省郴州市苏仙区*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | 本发明属于地下水微生物检测技术领域，具体公开了一种煤层气田地下水微生物检测方法。该方法包括提取地下水中的基因组DNA后，采用特异性引物分别对地下水中的古菌和细菌进行PCR扩增，使用16S rDNA v3区通用引物进行嵌套PCR扩增，使用DGGE对扩增产物进行分离；利用Image J对DGGE胶进行数字化，获得条带的位置及其亮度的信息后，使用Matlab对数据做PCA分析，用于解析地下微生物种群信息。本方法利用16S rDNA基因文库、引物PCR扩增和DGGE相结合的技术获得地下水样品微生物指纹图谱，能够准确、有效地分析地下水中微生物群落结构，为研究煤层气的生物生成途径、机理奠定了基础。 | ||
| 搜索关键词： | 煤层 气田 地下水 微生物 检测 方法 | ||
【主权项】：
煤层气田地下水微生物检测方法，其特征在于，该检测方法具体包括以下步骤：(1)采集煤层气田地下710～800m左右的地下水，盛装于充满氮气的厌氧瓶中，将厌氧瓶放置于‑22～‑25℃冰盒内保存；(2)在厌氧环境下，将上述采集到的地下水过滤到0.22μm的滤膜上，提取地下水中的基因组DNA；(3)采用引物对地下水中的细菌进行PCR扩增，并使用16S rDNA v3区通用引物进行嵌套PCR扩增，然后使用DGGE对扩增产物进行分离；(4)采用引物对地下水中的古菌进行PCR扩增，并使用16S rDNA v3区通用引物进行嵌套PCR扩增，然后使用DGGE对扩增产物进行分离；(5)利用Image J对DGGE胶进行数字化，获得条带的位置及其亮度的信息后，使用Matlab对数据做PCA分析，用于解析地下微生物种群信息。
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