[发明专利]一种采用载体吸附进行黑曲霉孢子增殖及其干孢子粉的制备方法

摘要

本发明公开了一种采用载体吸附进行黑曲霉孢子增殖及其干孢子粉的制备方法，包括按73的比例混合玉米麸皮，按照固形物总重量与水的体积比为15，将玉米麸皮与水混合，然后加入耐高温淀粉酶，100℃煮沸30分钟，过滤，获得黑曲霉孢子的培养液。将粉碎成体积为1cm3的玉米轴芯与黑曲霉培养液按13.5重量体积比混合，装入固态发酵罐，经121℃灭菌20分钟，冷却至37℃接入104~105CFU/mL黑曲霉孢子，以黑曲霉培养液体积计算。维持固态发酵罐温度37℃，培养120小时，洗脱黑曲霉孢子后加入复合保护剂，孢子悬液与复合保护剂体积比为2∶3，平衡时间为40 min，真空干燥，收集黑曲霉干孢子粉。本发明的制备方法提高了黑曲霉孢子粉存活率，延长了菌种的贮存期。同时加入复合干燥剂的方法耗能源少，工艺简单、成本低廉，更适于大型生产。

主权项

一种采用载体吸附进行黑曲霉孢子增殖的制备方法，其特征在于将一定比例的玉米与麸皮混合，然后高温淀粉酶液化，过滤，加入粉碎的玉米轴颗粒混合，灭菌，接种黑曲霉孢子，固态发酵罐培养，洗脱孢子悬液后加入复合保护剂，孢子悬液与复合保护剂体积比为2∶3，平衡时间为40 min，最后真空干燥，收集黑曲霉干孢子粉；且按如下的步骤进行；固态发酵罐37℃培养120h→洗脱孢子→加入保护剂→平衡40分钟→35℃真空干燥16h→收集干孢子；（1）黑曲霉孢子增殖培养液的制备：将玉米和麸皮按重量比为7:3的比例混合，按照固形物总重量与水的体积比为1:5，将玉米麸皮与水混合，按玉米重量每克12个单位将高温淀粉酶加入到上述混合物中液化，100℃煮沸30分钟，过滤，滤液定溶到原加水体积，即获得黑曲霉孢子的培养液；（2）固态发酵罐载体增殖黑曲霉孢子培养的制备：将粉碎成体积为1cm3的玉米轴芯与上述黑曲霉培养液按重量体积比1:3.5混合，装入固态发酵罐，经121℃灭菌20分钟，冷却至37℃接入黑曲霉孢子，接种量以黑曲霉培养液体积计算104~105CFU/mL，维持固态发酵罐温度37℃,培养120小时，洗脱后得到孢子悬液；（3）黑曲霉孢子粉的复合保护剂：将各组分保护剂准确称量完全溶解于一定的蒸馏水中，115℃，20min灭菌，冷却至室温，加入到孢子悬液中：所述的复合保护剂为：海藻糖5 g/100mL~ 10 g/100mL蛋白胨5 g/100mL ~10 g/100mL甘油2g/100mL~ 4g/100mL；（4）黑曲霉孢子粉的干燥：黑曲霉孢子粉干燥工艺为35℃、0.4×105Pa真空度干燥16h，收集得到黑曲霉干孢子粉。