[发明专利]伯胺基固定化酶载体及其制备方法

摘要

本发明公开了一种伯胺基固定化酶载体及其制备方法，正向悬浮聚合，得到大孔型聚甲基丙烯酸酯‑二烯丙基胺载体的粗品；对载体粗品进行洗涤、分级；进行胺基化反应得到含伯胺基的固定化酶载体。本发明技术方案用于多种生物酶的固定化，载体对于青霉素G酰化酶、D‑氨基酸氧化酶、GL‑7‑ACA酰化酶等具有较好的固定化效果，载酶活力高，机械强度及储存稳定性较好。本发明工艺简单、成本较低，且载体储存稳定性明显提高，有望应用于工业化大生产。

主权项

伯胺基固定化酶载体，其特征在于，伯胺基固定化酶载体为带有伯胺基的聚甲基丙烯酸酯‑二烯丙基胺聚合物，外观为乳白色至黄色不透明珠体，载体含水量60‑75％，功能基含量0.9‑2.6mmol/g，搅拌浊度50‑200NTU，最可几孔径20‑60nm，比表面积100‑400m2/g，按照下述步骤进行：步骤1，将油相与水相混合，搅拌以调节在水相中分散的油滴的粒径并形成稳定的聚合反应体系，升温至70‑85℃进行反应，以得到载体粗品；将0.5‑1.5质量份的偶氮二异丁腈(AIBN)、30‑40质量份的丙烯酸甲酯(MA)、10‑20质量份的甲基丙烯酸甲酯(MMA)、35‑55质量份的双甲基丙烯酸乙二醇酯(EGDMA)、5‑25质量份的二烯丙基胺(DAA)、40‑150质量份的甲苯、40‑90质量份的液蜡，搅拌混合均匀，配成油相；在600‑900质量份的水中加入4.5‑14质量份的羟乙基纤维素，搅拌均匀，配成水相；步骤2，将载体粗品与胺基化试剂混合，以使载体粗品进行胺基化反应，并水洗至中性，即制得成品伯胺基固定化酶载体，胺基化试剂为乙二胺(EDA)、1,4‑丁二胺(TDA)、1,6‑己二胺(HDA)、二乙烯三胺(DETA)、三乙烯四胺(TETA)或者四乙烯五胺(TEPA)。