[发明专利]伯胺基固定化酶载体及其制备方法

权利要求书

1.伯胺基固定化酶载体，其特征在于，伯胺基固定化酶载体为带有伯胺基的聚甲基丙烯酸酯-二烯丙基胺聚合物，外观为乳白色至黄色不透明珠体，载体含水量60-75％，功能基含量0.9-2.6mmol/g，搅拌浊度50-200NTU，最可几孔径20-60nm，比表面积100-400m²/g，按照下述步骤进行：

步骤1，将油相与水相混合，搅拌以调节在水相中分散的油滴的粒径并形成稳定的聚合反应体系，升温至70-85℃进行反应，以得到载体粗品；

将0.5-1.5质量份的偶氮二异丁腈、30-40质量份的丙烯酸甲酯、10-20质量份的甲基丙烯酸甲酯、35-55质量份的双甲基丙烯酸乙二醇酯、5-25质量份的二烯丙基胺、40-150质量份的甲苯、40-90质量份的液蜡，搅拌混合均匀，配成油相；在600-900质量份的水中加入4.5-14质量份的羟乙基纤维素，搅拌均匀，配成水相；

步骤2，将载体粗品与胺基化试剂混合，以使载体粗品进行胺基化反应，并水洗至中性，即制得成品伯胺基固定化酶载体，胺基化试剂为乙二胺、1,4-丁二胺、1,6-己二胺、二乙烯三胺、三乙烯四胺或者四乙烯五胺。

2.根据权利要求1所述的伯胺基固定化酶载体，其特征在于，在步骤1中，油相组成由32-38质量份的丙烯酸甲酯、12-17质量份的甲基丙烯酸甲酯、35-50质量份的双甲基丙烯酸乙二醇酯、6-20质量份的二烯丙基胺、0.5-1.5质量份的偶氮二异丁腈、50-120质量份的甲苯和45-85质量份的液蜡组成。

3.根据权利要求1所述的伯胺基固定化酶载体，其特征在于，在步骤1中，水相由600-900质量份的水中加入4.5-14质量份的羟乙基纤维素组成。

4.根据权利要求1所述的伯胺基固定化酶载体，其特征在于，在步骤1中，升温至70-85℃进行反应12-18h后滤出液体，用热水、丙酮洗涤固体后筛分至所需粒度规格，得到载体粗品。

5.根据权利要求1所述的伯胺基固定化酶载体，其特征在于，在步骤2中，在50-80℃搅拌下反应12-48h。

6.伯胺基固定化酶载体的制备方法，其特征在于，按照下述步骤进行：

步骤1，将油相与水相混合，搅拌以调节在水相中分散的油滴的粒径并形成稳定的聚合反应体系，升温至70-85℃进行反应，以得到载体粗品；

将0.5-1.5质量份的偶氮二异丁腈、30-40质量份的丙烯酸甲酯、10-20质量份的甲基丙烯酸甲酯、35-55质量份的双甲基丙烯酸乙二醇酯、5-25质量份的二烯丙基胺、40-150质量份的甲苯、40-90质量份的液蜡，搅拌混合均匀，配成油相；在600-900质量份的水中加入4.5-14质量份的羟乙基纤维素，搅拌均匀，配成水相；

步骤2，将载体粗品与胺基化试剂混合，以使载体粗品进行胺基化反应，并水洗至中性，即制得成品伯胺基固定化酶载体，胺基化试剂为乙二胺、1,4-丁二胺、1,6-己二胺、二乙烯三胺、三乙烯四胺或者四乙烯五胺。

7.根据权利要求6所述的伯胺基固定化酶载体的制备方法，其特征在于，在步骤1中，油相组成由32-38质量份的丙烯酸甲酯、12-17质量份的甲基丙烯酸甲酯、35-50质量份的双甲基丙烯酸乙二醇酯、6-20质量份的二烯丙基胺、0.5-1.5质量份的偶氮二异丁腈、50-120质量份的甲苯和45-85质量份的液蜡组成；水相由600-900质量份的水中加入4.5-14质量份的羟乙基纤维素组成；升温至70-85℃进行反应12-18h后滤出液体，用热水、丙酮洗涤固体后筛分至所需粒度规格，得到载体粗品。

8.根据权利要求6所述的伯胺基固定化酶载体的制备方法，其特征在于，在步骤2中，在50-80℃搅拌下反应12-48h。

9.权利要求1—5任一项所述的伯胺基固定化酶载体在固定化青霉素G酰化酶制备6-氨基青霉烷酸，或者固定化D-氨基酸氧化酶制备戊二酰-7-氨基头孢烷酸，或者固定化GL-7-ACA酰化酶制备7-氨基头孢烷酸，或者固定化青霉素G酰化酶合成阿莫西林中的应用。