[发明专利]一种定量检测猪瘟病毒IgG抗体竞争ELISA试剂盒及其检测方法有效
| 申请号： | 201710301443.8 | 申请日： | 2017-05-02 |
| 公开（公告）号： | CN107064501B | 公开（公告）日： | 2019-04-16 |
| 发明（设计）人： | 杨顺利;尹双辉;尚佑军;袁莉;吴锦艳;蔡建平;刘湘涛 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院兰州兽医研究所 |
| 主分类号： | G01N33/569 | 分类号： | G01N33/569;G01N33/543;G01N33/577;G01N21/31;G01N21/78 |
| 代理公司： | 甘肃省知识产权事务中心 62100 | 代理人： | 张克勤 |
| 地址： | 730046 甘肃*** | 国省代码： | 甘肃;62 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种定量检测猪瘟病毒IgG抗体竞争ELISA试剂盒及其检测方法，属于生物领域，以解决现有CSFV血清抗体检测ELISA试剂盒存在的稳定性差和保质期短等问题。本发明试剂盒是将特异性鉴定和筛选来自猪瘟病毒疫苗株C‑株编码的E2蛋白两个重复的抗原结构域A通过柔性氨基酸接头、半胱氨酸、疏水氨基酸进行融合串联，并在大肠杆菌E.coli中成功获得重组表达蛋白，重组蛋白命名为r2E2，以其作为抗原建立的定量检测抗猪瘟病毒E2蛋白IgG抗体竞争ELISA试剂盒。本试剂盒的检测结果能够反应接种疫苗过程中，机体抗CSFV血清IgG抗体变化规律，为养猪户CSF防控提供科学合理的技术支持。 | ||
| 搜索关键词： | 试剂盒 竞争ELISA 定量检测 猪瘟病毒 血清抗体检测 重组表达蛋白 猪瘟病毒疫苗 血清IgG抗体 大肠杆菌 抗原结构域 柔性氨基酸 疏水氨基酸 特异性鉴定 半胱氨酸 变化规律 发明试剂 反应接种 技术支持 检测结果 生物领域 重组蛋白 保质期 检测 抗原 串联 疫苗 筛选 融合 重复 成功 | ||
【主权项】：
1.一种定量检测猪瘟病毒IgG抗体竞争ELISA试剂盒，其特征在于：将特异性鉴定和筛选来自猪瘟病毒疫苗株C‑株编码的E2蛋白两个重复的抗原结构域A通过柔性氨基酸接头、半胱氨酸、疏水氨基酸进行融合串联，并在大肠杆菌E.coli中成功获得重组表达蛋白，重组蛋白命名为r2E2，以其作为抗原建立的定量检测抗猪瘟病毒E2蛋白IgG抗体竞争ELISA试剂盒；柔性接头的编码氨基酸为GGGGSGGGGS；试剂盒包括抗原包被板、血清样品稀释液、洗涤液、TMB底物液、终止液；抗原包被板包括预包被r2E2抗原、抗原稳定剂、酶标板、封闭液、标准IgG样品；所述抗原组成为：N‑domainA‑Cys‑Lys5‑linker‑Lys5‑Cys‑domain A‑C。
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