[发明专利]一种反光素蛋白的提取方法有效
| 申请号： | 201710277250.3 | 申请日： | 2017-04-25 |
| 公开（公告）号： | CN107475332B | 公开（公告）日： | 2021-09-10 |
| 发明（设计）人： | 谢灿;管哲;蔡甜甜 | 申请（专利权）人： | 北京大学 |
| 主分类号： | C12P21/02 | 分类号： | C12P21/02;C07K1/36;C07K1/30;C07K1/22;C07K1/16;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京邦信阳专利商标代理有限公司 11012 | 代理人： | 黄泽雄;陈悦军 |
| 地址： | 100871 北京市海淀*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明属于生物技术领域，提供了一种反光素蛋白的提取方法，包括步骤：培养表达反光素蛋白的菌株，收获菌体并超声裂解；离心获得沉淀后在多种缓冲液中重悬、温育并纯化。利用本发明的方法能够获得具有活性的可溶形式的反光素蛋白，为研究反光素蛋白的性质以及更好地使用反光素蛋白提供了有利条件。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 反光 蛋白 提取 方法 | ||
【主权项】：
一种反光素蛋白的提取方法，包括：1)培养表达反光素蛋白的菌株，收获菌体并超声裂解；2)离心步骤1)得到的裂解液，收集沉淀，将沉淀重悬于缓冲液R中，温育30min～1h，再次离心并收集沉淀，所述缓冲液R包含10～20mM Tris、150mM NaCl、0.3％～1％Triton X‑100，pH 8.0；3)将步骤2)得到的沉淀清洗三次，然后重悬于缓冲液S中，温育30min以上，离心，所述缓冲液S包含10～20mM Tris、150mM NaCl、0.05％～2％SDS，pH 8.0；4)取步骤3)的离心上清液，向其中加入咪唑，利用Ni‑NTA亲和层析纯化。
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