[发明专利]一种陆地棉I式果枝的分子鉴定方法有效
| 申请号： | 201710219988.4 | 申请日： | 2017-04-06 |
| 公开（公告）号： | CN106755564B | 公开（公告）日： | 2019-12-13 |
| 发明（设计）人： | 秦鸿德;张友昌;冯常辉;宋成攀 | 申请（专利权）人： | 湖北省农业科学院经济作物研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895 |
| 代理公司： | 11465 北京慕达星云知识产权代理事务所(特殊普通合伙) | 代理人： | 王鹏 |
| 地址： | 430000 *** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种陆地棉I式果枝的分子鉴定方法，根据与陆地棉果枝形态共分离的基因Gorai.001G121800_ATC中位于第2外显子的第17个碱基处的SNP位点设计dCAPS引物，通过一个碱基错配引入酶切位点，进而使DNA自SNP位点切开，具有G→A突变的片段就被切成了22bp和226bp，没有G→A突变的SNP位点无法切开。因此根据酶切后226bp处电泳条带的有无即可判断该材料是否为具有G→A突变的陆地棉I式果枝。本发明通过一个SNP位点的差异就能鉴定出材料目的性状的区别，鉴定效率高；引入限制性内切酶酶切位点后，酶切出特异性条带，鉴定结果的准确度高；鉴定过程操作简单，可公式化，易于推广应用。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 陆地棉 果枝 分子 鉴定 方法 | ||
【主权项】：
1.一种陆地棉I式果枝的分子鉴定方法，其特征在于，包括以下步骤：/n(1)对棉花进行DNA提取；/n(2)根据与陆地棉果枝形态共分离的基因Gorai.001G121800_ATC中位于第2外显子的第17个碱基处的SNP位点设计dCAPS引物，所述dCAPS引物如下：/n正向引物SEQ ID No.1：5’-TTCAACACCAACAAGCAGGT-3’；/n反向引物SEQ ID No.2：5’-GGTCACTAGGACCAGGAACAA-3’；/n并且以步骤(1)得到的DNA为模板进行PCR扩增；/n(3)使用限制性内切酶Mun I对步骤(2)得到的产物进行酶切，37℃水浴2-4个小时；/n(4)对步骤(3)得到的酶切产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳检测，并进行染色，根据226bp处的特异性酶切条带判断共分离基因的有无，从而确定果枝类型。/n
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