[发明专利]一种用于结核分枝杆菌感染检测的试剂盒及检测方法

摘要

本发明公开了一种用于结核分枝杆菌感染检测的试剂盒，包括如下部分：由检测引物、10倍环介导等温扩增反应液、DNA聚合酶、阳性对照、阴性对照、显色剂和菌体扩培液组成；所述的检测引物是由一对外引物F3/B3和一对内引物FIP/BIP组成。该试剂盒能够高效、快速、准确、灵敏的得到血液中结核分枝杆菌感染的检测结果，且检测结果特异性高、敏感性强，结果判断不需要使用电泳、眼易判断，非常适用于结核分枝杆菌的快速检测。

主权项

一种用于结核分枝杆菌感染检测的试剂盒，其特征在于，包括如下部分：由检测引物、10倍环介导等温扩增反应液、DNA聚合酶、阳性对照、阴性对照、显色剂和菌体扩培液组成；所述的检测引物是由一对外引物F3/B3和一对内引物FIP/BIP组成，外引物F3的序列为：5’‑CTGGGCCTCAAGCAAGG‑3’外引物B3的序列为：5’‑CGACGTCGCTGACCACTT‑3’内引物FIP的序列为：5’‑CGGGCGACGGTTTCGAAGTCGGAAGACGGGGTCAACGGT‑3’内引物BIP的序列为：5’‑CGGCTGCAAGAGATGGCGTCTTGGGTCACCCTCTCGT‑3’其中，所述的一对外引物F3/B3与一对内引物FIP/BIP的摩尔数之比为1：6；所述的DNA聚合酶为BstDNA聚合酶，活力为8U/微升；所述的阴性对照为灭菌双蒸水；每升所述菌体扩培液由以下组分制成：5‑10g的葡萄糖、5‑10g的鸡蛋清、6.7μmol的EDTA、100mL的甘油、30mmoL的二硫苏糖醇、8‑12g的PEG‑4000，余量为双蒸水；每毫升所述显色剂由以下组分制备而成：950‑960μL的20倍SYBR Green I、10‑15mg的KCl，余量为双蒸水。