[发明专利]一种基于核酸适配体的荧光传感器检测腺苷的方法有效
申请号: | 201710117762.3 | 申请日: | 2017-03-01 |
公开(公告)号: | CN106950206B | 公开(公告)日: | 2020-03-31 |
发明(设计)人: | 周学敏;沈心;徐磊;朱婉莹;李昺之 | 申请(专利权)人: | 南京医科大学 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64 |
代理公司: | 北京思创大成知识产权代理有限公司 11614 | 代理人: | 尹慧晶 |
地址: | 210029 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种基于核酸适配体的荧光传感器检测腺苷的方法,该方法以适配体修饰的金纳米粒作为识别探针和能量受体,以适配体互补链修饰的碳点作为荧光探针和能量供体。通过杂交反应,金纳米粒和碳点之间发生荧光共振能量转移,检测体系的荧光发生猝灭,加入腺苷后,腺苷和适配体互补链竞争与适配体结合,使金纳米粒和碳点之间的能量转移效率减弱,检测体系的荧光恢复,基于这种荧光信号的变化实现腺苷的定量检测。本方法优点在于特异性强,操作简便,所需样品量少,灵敏度高的优点,能够用于血样中腺苷的测定,为临床诊断疾病提供有利分析数据。 | ||
搜索关键词: | 一种 基于 核酸 适配体 荧光 传感器 检测 腺苷 方法 | ||
【主权项】:
一种基于核酸适配体的荧光传感器检测腺苷的方法,其特征在于包括如下步骤:a)构建荧光适配体传感器:将适配体修饰的金纳米粒和适配体互补链修饰的碳点按1:3:~3:1的体积比例混合,加入磷酸缓冲液,37℃孵育杂交构建荧光适配体传感器;b)标准曲线的绘制:在步骤a)构建的传感器中,加入多个不同已知浓度的腺苷溶液使体系内腺苷浓度在0nmol/L~500nmol/L范围内,室温孵育20min~60min,测定各自的荧光强度值F,同时测定空白荧光值F0,作相对荧光强度[(F‑F0)/F0]与腺苷浓度对应的标准曲线;c)荧光检测腺苷:在步骤a)构建的传感器中,加入未知腺苷浓度的溶液,测定其荧光强度值,根据步骤b)所述标准曲线得到待测溶液中腺苷的浓度。
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