[发明专利]一种基于核酸适配体的荧光传感器检测腺苷的方法

权利要求书

1.一种基于核酸适配体的荧光传感器检测腺苷的方法，其特征在于包括如下步骤：

a)构建荧光适配体传感器：将适配体修饰的金纳米粒和适配体互补链修饰的碳点按1:3~3:1的体积比例混合，加入磷酸缓冲液，37℃孵育杂交构建荧光适配体传感器；

b)标准曲线的绘制：在步骤a)构建的传感器中，加入多个不同已知浓度的腺苷溶液使体系内腺苷浓度在0 nmol/L~500 nmol/L范围内，室温孵育20 min~60 min，测定各自的荧光强度值F，同时测定空白荧光值F₀，作相对荧光强度[(F-F₀)/F₀]与腺苷浓度对应的标准曲线；

c)荧光检测腺苷：在步骤a)构建的传感器中，加入未知腺苷浓度的溶液，测定其荧光强度值，根据步骤b)所述标准曲线得到待测溶液中腺苷的浓度；

其中，腺苷核酸适配体序列为5’-SH-C₆-AGA GAA CCT GGG GGA GTA TTG CGG AGG AAGGT-3’，所述适配体互补链序列为5’-NH₂-C₆-ACC TTC CTC CGC-3’。

2.根据权利要求1所述的基于核酸适配体的荧光传感器检测腺苷的方法，其特征在于，aptamer-AuNPs作为能量受体和识别探针，ssDNA-CDs作为能量供体和荧光探针，利用加入腺苷前后体系荧光信号的变化，实现对目标物的定量检测。

3.根据权利要求1所述的基于核酸适配体的荧光传感器检测腺苷的方法，其特征在于步骤a)中，磷酸缓冲液浓度范围在10 mmol/L~50 mmol/L，体积范围在50 μL ~200 μL，pH范围在6.5~7.5。

4.根据权利要求1所述的基于核酸适配体的荧光传感器检测腺苷的方法，其特征在于步骤a)中，孵育杂交的时间范围在30 min~60 min。

5.根据权利要求1所述的基于核酸适配体的荧光传感器检测腺苷的方法，其特征在于体系内腺苷浓度梯度为：10 nM， 25 nM， 150 nM， 250 nM，350 nM，500 nM。

6.根据权利要求1所述的一种基于核酸适配体的荧光传感器检测腺苷的方法，其特征在于步骤b)或c)中，荧光检测条件为：测定体系在460nm处的荧光强度，激发波长为365 nm，扫描速度为1200 nm min^-1，光电倍增管电压为700 V，激发狭缝和发射狭缝宽度为5 nm。