[发明专利]一种高效扩增NK细胞的方法在审
| 申请号： | 201710096536.1 | 申请日： | 2017-02-22 |
| 公开（公告）号： | CN106754730A | 公开（公告）日： | 2017-05-31 |
| 发明（设计）人： | 袁彩艳;吴卫成;刘根桃;吴国祥;柴勋 | 申请（专利权）人： | 上海科医联创生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10;C12N5/0783;C12N13/00 |
| 代理公司： | 上海申新律师事务所31272 | 代理人： | 俞涤炯 |
| 地址： | 201321 上海市浦东新区中国*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种高效扩增NK细胞的方法，具体是一种使用高表达膜蛋白CD19、CD137L、CD86、CD64及跨膜蛋白IL‑21的K562工程细胞联合人IL‑2突变体高效扩增NK细胞的方法。本发明方法操作简单，成本低，获得的NK细胞数量大、纯度高、杀伤效果好，适合NK细胞的大规模制备，为NK细胞过继性免疫治疗应用于临床打下了良好的基础。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 高效 扩增 nk 细胞 方法 | ||
【主权项】：
一种高效扩增NK细胞的方法，其特征在于，包括下列步骤：步骤一，将CD8α‑IL‑21、CD19、CD137L、CD86、和CD64的基因利用外源表达载体转染K562细胞；步骤二，当外源表达载体进入宿主细胞后，激活启动子，体外培养K562细胞并分选获得稳定表达CD8α‑IL‑21、CD19、CD137L、CD86、和CD64的K562工程细胞；步骤三，将步骤二获得的K562工程细胞经过γ射线照射灭活，成为K562滋养细胞；步骤四，分离并提取外周血单个核细胞，在IL‑2突变体协同作用下，将步骤三获得的K562滋养细胞与外周血单个核细胞共培养，获得NK细胞。
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