[发明专利]96孔板固相萃取南极磷虾中磷脂酰胆碱的方法

摘要

本发明公开了一种96孔板固相萃取南极磷虾中磷脂酰胆碱的方法，包括以下步骤：南极磷虾肌肉组织经预处理，得南极磷虾粉；在南极磷虾粉中加入有机溶剂Ⅰ后混合均匀，冰浴超声提取，然后加入水震荡离心，待溶液分层后移取下清液；先将下清液减压干燥，然后用有机溶剂Ⅱ复溶后，得到南极磷虾磷脂粗提液；使用有机溶剂Ⅲ水溶液活化96孔板固相萃取板，经南极磷虾磷脂粗提液上样、有机溶剂Ⅲ水溶液淋洗、有机溶剂Ⅳ或有机溶剂Ⅳ水溶液洗脱后，得到纯化后的磷脂酰胆碱提取物。

主权项

1.96孔板固相萃取南极磷虾中磷脂酰胆碱的方法，其特征是包括以下步骤：1)、原料预处理：取南极磷虾肌肉组织，洗净后研磨成糜，再真空干燥后粉碎成粉末，得南极磷虾粉；真空干燥至含水率≤5％；粉碎至粉末能过80～100目筛；2)、粗提液制备：在南极磷虾粉中加入有机溶剂Ⅰ后混合均匀，冰浴超声提取，然后加入水震荡离心，待溶液分层后移取下清液；先将下清液减压干燥，然后用有机溶剂Ⅱ复溶后，得到南极磷虾磷脂粗提液；所述有机溶剂Ⅰ为甲醇：氯仿＝1：2体积比的混合液，南极磷虾粉与有机溶剂Ⅰ的料液比为1g/25～35ml；所述水的用量为有机溶剂Ⅰ的0.5～1体积倍；所述有机溶剂Ⅱ为甲醇，南极磷虾粉与有机溶剂Ⅱ的料液比为1g/8～12ml；震荡离心为于12,000±1000rpm/min的速度、4±0.5℃的温度下高速冷冻离心5±1分钟；3)、96孔板固相萃取：96孔板固相萃取板的每个孔中的填料为25mg的二氧化锆；使用有机溶剂Ⅲ水溶液活化96孔板固相萃取板，经南极磷虾磷脂粗提液上样、有机溶剂Ⅲ水溶液淋洗、有机溶剂Ⅳ水溶液洗脱后，得到纯化后的磷脂酰胆碱提取物；有机溶剂Ⅲ水溶液是体积浓度5％的乙腈；有机溶剂Ⅳ水溶液为体积浓度90％的乙腈；淋洗和洗脱时的流速均为0.6mL/min。