[发明专利]一种预防污染的稻曲病菌薄壁分生孢子的制备培养方法

摘要

本发明公开了一种预防污染的稻曲病菌薄壁分生孢子的制备培养方法，利用三角瓶能有效阻隔普通微生物的特性，采用普通三角瓶作制备培养孢子的器具，以马铃薯蔗糖培养基作产孢培养基，制备培养高质量的稻曲病菌薄壁分生孢子，制备培养方法步骤如下1)将普通三角瓶洁净备用；2)马铃薯蔗糖培养基作产孢培养基，制备三角瓶式培养基；3)母体菌体的移植；4)在28℃温度条件下产孢培养；5)用无菌水洗脱收集新一代薄壁分生孢子。本发明的优点是1)无需振荡培养设备，获得的分生孢子液成品含菌丝体、培养基、及菌体代谢外泌产物等较少；2)三角瓶配上常规瓶塞后，能阻隔普通微生物的通过，很好地保护三角瓶内不受杂菌污染，因而能高效预防污染，获得高质量的孢子成品；3)三角瓶内收集孢子比培养皿内收集孢子的操作更为方便；三角瓶的保护可使得产孢菌落能随意放置一段时间而不受污染，并保持产孢状态，便于与需要孢子的工作程序衔接。

主权项

一种预防污染的稻曲病菌薄壁分生孢子的制备培养方法，其特征在于，制备培养方法的步骤如下：1)采用普通三角瓶作制备培养孢子的器具，将三角瓶洁净备用；2)三角瓶式产孢培养基的制备：用马铃薯蔗糖培养基作产孢培养基，该培养基的配比为：马铃薯100g、蔗糖10g、琼脂20g、水1000mL；将培养基分装于步骤1)准备的三角瓶，常规高压高温灭菌后成为三角瓶式培养基，备用；3)母体菌体的移植：以实验室已有的稻曲病菌分生孢子液作母菌体，用移液器将母孢子液移植入步骤2)制备的三角瓶式培养基，并使孢子液在培养基面上分散均匀；4)产孢培养：将步骤3)操作完备后的三角瓶式培养基转入温度为28℃的普通培养箱内培养；5)新一代孢子的收集：通常步骤4)培养5天后，培养基面上已形成大量的微小菌落，菌落上形成大量的分生孢子；用无菌水洗脱菌落上的孢子，并集中到灭菌容器内，即获得无杂菌污染的较高质量的稻曲病菌薄壁分生孢子液。