[发明专利]斯氏副柔线虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂Pj_CPI基因克隆、重组表达方法及应用有效
申请号: | 201710002348.8 | 申请日: | 2017-01-03 |
公开(公告)号: | CN106636122B | 公开(公告)日: | 2019-11-26 |
发明(设计)人: | 刘春霞;冯陈晨;王文龙;呼和巴特尔 | 申请(专利权)人: | 内蒙古农业大学 |
主分类号: | C12N15/15 | 分类号: | C12N15/15;C07K14/81;C12N15/70;C12N15/66;C12Q1/686 |
代理公司: | 11385 北京方圆嘉禾知识产权代理有限公司 | 代理人: | 董芙蓉<国际申请>=<国际公布>=<进入 |
地址: | 010018 内蒙古自治区呼和*** | 国省代码: | 内蒙;15 |
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摘要: | 本发明公开了斯氏副柔线虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂Pj_CPI基因克隆、重组表达方法及应用,通过斯氏副柔线虫转录组测序,预测出的编码基因与已公布的线虫数据库比对分析,找出斯氏副柔线虫特有基因,用RT‑PCR方法从斯氏副柔线虫中扩增出特有基因Pj_CPI,克隆测序后,构建到原核表达载体pET30a中,转化至E.coli BL21,进行诱导表达,用Western‑bloting法验证重组蛋白rCPI的免疫原性。斯氏副柔线虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂Pj_CPI基因重组蛋白经纯化后,建立了家畜斯氏副柔线虫iELISA检测方法。 | ||
搜索关键词: | 斯氏副柔 线虫 半胱氨酸 蛋白酶 抑制剂 pj_cpi 基因 克隆 重组 表达 方法 应用 | ||
【主权项】:
1.斯氏副柔线虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂Pj_CPI基因,其特征在于,其核苷酸序列如SEQID NO:1所示;所述斯氏副柔线虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂Pj_CPI基因的编码蛋白,其序列如SEQ ID NO:5所示;用于扩增所述斯氏副柔线虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂Pj_CPI基因的特异性PCR引物,其核苷酸序列如SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4所示。/n
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