[发明专利]一种用于微生物法定量检测烟酸的微孔板、其试剂盒及其制备方法有效
| 申请号： | 201710002301.1 | 申请日： | 2017-01-03 |
| 公开（公告）号： | CN106676161B | 公开（公告）日： | 2020-01-21 |
| 发明（设计）人： | 刘龙飞;高天垒;卜庆婧 | 申请（专利权）人： | 北京中检葆泰生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/02 | 分类号： | C12Q1/02;C12R1/25 |
| 代理公司： | 11450 北京欣永瑞知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人： | 张庆敏 |
| 地址： | 101111 北京市大兴区北京*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明提供一种用于微生物法定量检测烟酸的微孔板，其由如下步骤制备而成：1)将活化后的植物乳杆菌菌株接种处理，弃去上清液；2)加入10‑12ml海藻糖/蔗糖和氯化钙混合液，混匀后离心1‑2min，弃去上清液，重复前述操作一次，混匀，制得菌悬液；吸1‑2ml菌悬液至10‑12ml海藻糖/蔗糖和氯化钙混合液中，混匀制成测试菌液；3)将所述测试菌液2‑4μl添加至微孔板各孔中，在低真空环境下稍稍加热测试菌液，使测试菌液在33‑37℃的温度条件下沸腾而产生泡沫，并在所述低真空环境和室温下蒸发干燥36‑48h，或者冷冻后再以升华的方式干燥36‑48h。本发明还提供包含该微孔板的试剂盒及其制备方法。本发明降低了试剂盒中的菌种损失，提高了烟酸检测结果的准确性。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 用于 微生物 法定 检测 烟酸 微孔 试剂盒 及其 制备 方法 | ||
【主权项】：
1.一种制备用于微生物法定量检测烟酸的微孔板的方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：/n1)活化植物乳杆菌，将活化后的植物乳杆菌菌株接种到乳杆菌肉汤培养基中，32-36℃培养16-20h，2200转/min离心1-2min，弃去上清液；/n2)加入10-12ml蔗糖和氯化钙混合液，混匀后离心1-2min，弃去上清液，重复前述操作一次，然后再加入10-12ml蔗糖和氯化钙混合液，混匀，制得菌悬液；吸1-2ml菌悬液至10-12ml蔗糖和氯化钙混合液中，混匀制成测试菌液；/n3)将所述测试菌液1μl添加至微孔板各孔中，分别在20mTorr、55mTorr、510mTorr、5Torr、45Torr、210Torr的低真空环境下加热测试菌液，使测试菌液在33-37℃的温度条件下沸腾而产生泡沫，并在所述低真空环境和室温下蒸发干燥36-48h，/n其中，所述植物乳杆菌菌株为植物乳杆菌ATCC8014，并且步骤2)中蔗糖和氯化钙混合液中，各自的浓度分别为180-190mM、10-12mM。/n
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