[发明专利]用于在采用ddNTP的方法中防止假阳性的方法和产品在审
申请号: | 201680017745.6 | 申请日: | 2016-02-01 |
公开(公告)号: | CN107709573A | 公开(公告)日: | 2018-02-16 |
发明(设计)人: | K·鲁迪;R·C·维尔松 | 申请(专利权)人: | 挪威生命科学大学;赫德马克应用科学大学 |
主分类号: | C12Q1/6869 | 分类号: | C12Q1/6869;C12Q1/6848;C12Q1/6816 |
代理公司: | 北京邦信阳专利商标代理有限公司11012 | 代理人: | 黄泽雄,侯海燕 |
地址: | 挪威*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | 本发明涉及一种当在聚合酶的存在下防止ddNTP与双链多核苷酸的不期望的结合的方法。这样的方法可以用于防止在采用ddNTP的方法中(例如在序列检测法中)出现假阳性。本发明还提供了一种避免假Tm读数或假FRET效应(例如假阳性淬灭)的方法,例如在熔解曲线分析方法中。特别地,本发明提供了一种方法,其中使用以下方法检测待测多核苷酸中的目标核苷酸序列,该方法中根据目标序列是否存在,产生可能包含或可能不包含两个标签的双链分子,其中所述两个标签的存在优选地通过进行熔解曲线分析确定。 | ||
搜索关键词: | 用于 采用 ddntp 方法 防止 阳性 产品 | ||
【主权项】:
一种在聚合酶的存在下抑制ddNTP与多核苷酸的结合的方法,其中所述多核苷酸为双链,但是可以任选地包括长度为至多10个核苷酸的单链区域,其中当所述单链区域提供5’突出序列时,其在紧邻双链区域不包括与所述ddNTP互补的碱基,其中所述方法(i)包括灭活、降解或除去所述聚合酶,去磷酸化或除去所述ddNTP和/或用另一种ddNTP竞争胜过所述ddNTP,和/或(ii)使用具有一个单链区域的多核苷酸,所述单链区域提供长度为至少1个核苷酸的3'突出序列或长度为至少2个核苷酸的5'突出序列,和/或使用在多核苷酸的一个或两个末端具有长度为至少1个核苷酸的单链区域的多核苷酸,并且所述单链区域至少部分地由所述多核苷酸中的一个或多个碱基对之间的错配导致,其中优选地所述方法包括熔解曲线分析。
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