[发明专利]一种猪瘟病毒(CSFV)实时荧光核酸恒温扩增检测试剂盒在审
申请号: | 201611269746.8 | 申请日: | 2016-12-30 |
公开(公告)号: | CN108265125A | 公开(公告)日: | 2018-07-10 |
发明(设计)人: | 杨胜德;孙洁;杨俊兴;花群义;于明辉;居金良 | 申请(专利权)人: | 上海仁度生物科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6806;C12Q1/6844;C12R1/93 |
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地址: | 201201 上海市张江*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明公开了一种猪瘟病毒(CSFV)的实时荧光核酸恒温扩增检测试剂盒。包括:捕获探针、CSFV检测引物T7引物和nT7引物、CSFV检测探针、M‑MLV反转录酶和T7 RNA聚合酶等试剂。本发明试剂盒能够检测猪脏器,排泄物,组织培养物中的RNA,具有特异性高、灵敏度高(可达100copies/反应)、污染低(扩增产物RNA在自然环境下易于降解)及快速检测(常规50分钟完成检测)的特点,将在畜牧养殖业健康养殖及安全肉制品监管发挥重要作用,应用前景广阔。 | ||
搜索关键词: | 恒温扩增检测 实时荧光 猪瘟病毒 试剂盒 核酸 引物 应用前景广阔 畜牧养殖业 组织培养物 排泄物 捕获探针 发明试剂 反转录酶 检测探针 检测引物 快速检测 扩增产物 灵敏度 猪脏器 检测 肉制品 降解 自然环境 养殖 监管 污染 健康 安全 | ||
【主权项】:
1.一种猪瘟猪瘟病毒(CSFV)的实时荧光核酸恒温扩增检测试剂盒,包含有一条可与如序列表中序列1所示的猪瘟病毒的靶标核酸CSFV RNA序列特异结合的捕获探针,一对用于在M‑MLV反转录酶作用下产生CSFV靶标核酸的DNA拷贝的CSFV扩增引物T7和nT7,一条用于与在T7 RNA聚合酶作用下根据所述CSFV靶标核酸的DNA拷贝产生的RNA拷贝特异结合的CSFV检测探针,以及可与CSFV靶标核苷酸CSFV RNA使用同一对引物即T7和nT7的竞争性内标和内标检测探针;其特征在于,所述捕获探针的核苷酸序列如序列表中序列2所示;所述CSFV扩增引物由T7引物和nT7引物组成,T7引物序列如序列表中序列3所示,nT7引物序列如序列表中序列4所示;所述CSFV检测探针的核苷酸序列如序列表中序列5所示,5’端标记FAM荧光基团,3’端标记DABCYL淬灭基团;所述CSFV内标由序列表中序列7所示的含CSFV内标RNA,所述内标检测探针的核苷酸序列如序列表中序列6所示,5’端标记HEX荧光基团,3’端标记DABCYL淬灭基团。
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