[发明专利]由基因工程化的人造抗原提呈细胞的分泌小体所构建的T细胞疫苗及其制备方法和应用在审
| 申请号： | 201611138324.7 | 申请日： | 2016-12-12 |
| 公开（公告）号： | CN108607094A | 公开（公告）日： | 2018-10-02 |
| 发明（设计）人： | 项建华 | 申请（专利权）人： | 项雯华 |
| 主分类号： | A61K39/00 | 分类号： | A61K39/00;A61K39/12;A61P31/20;A61P35/00;A61P37/06;C12N5/0783;C12N5/0784 |
| 代理公司： | 上海三和万国知识产权代理事务所(普通合伙) 31230 | 代理人： | 任艳霞 |
| 地址： | 201100 上海*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了由基因工程化的人造抗原提呈细胞aAPC的分泌小体囊泡，exosome所构建的T细胞疫苗的制备及应用。本发明通过转染两种真核表达质粒载体pcDNAHLA‑A2、pcDNACD80和感染两种重组腺病毒载体AdVGag、AdV41BBL，构造了一种基因工程化的K562A2/Gag/CD80/41BBLaAPC。然后通过差速超高速离心法从K562A2/Gag/CD80/41BBL培养上清液中纯化exosomes，并进行电子显微镜和免疫印迹分析。这些exosomes通过孵育和Con‑A刺激的HLA‑A2转基因小鼠的非特异性T细胞共孵育而构建了具有HLA‑A2限制性的和Gag特异性的Gag‑Texo疫苗。本发明用无限来源的不断生长的人工抗原提呈细胞aAPCK562A2/Gag/CD80/41BBL囊泡替换有限来源的DC囊泡用于制备HIV‑1Gag特异性T细胞疫苗。这种新颖的使用基因工程化抗原提呈细胞的囊泡制备T细胞疫苗的方法将对HIV‑1患者临床治疗性疫苗的研制具有重要的影响。 | ||
| 搜索关键词： | 基因工程化 抗原提呈细胞 构建 囊泡 小体 分泌 制备 疫苗 真核表达质粒载体 制备方法和应用 重组腺病毒载体 免疫印迹分析 人工抗原提呈 超高速离心 电子显微镜 培养上清液 转基因小鼠 非特异性 临床治疗 共孵育 差速 孵育 泡制 转染 替换 细胞 刺激 感染 生长 应用 | ||
【主权项】：
1.由基因工程化的人造抗原提呈细胞的分泌小体所构建的T细胞疫苗，其特征在于：包含由基因工程化的人造抗原提呈细胞的分泌小体所构建的T细胞及药用载体；所述由基因工程化的人造抗原提呈细胞通过载体将基因转染到K562细胞而达到基因工程的转化，所述载体可以包括真核质粒载体和/或病毒载体；所述分泌小体由所述由基因工程化的人造抗原提呈细胞分泌；所述由基因工程化的人造抗原提呈细胞的分泌小体所构建的T细胞，由T细胞摄取分泌小体而形成的具有免疫刺激作用的细胞。
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