[发明专利]一种通过去热原纯化降纤酶的方法在审
| 申请号： | 201611136474.4 | 申请日： | 2016-12-12 |
| 公开（公告）号： | CN106834258A | 公开（公告）日： | 2017-06-13 |
| 发明（设计）人： | 刘乃山 | 申请（专利权）人： | 青岛冠龙生物制药有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/64 | 分类号： | C12N9/64 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 266300 山东省青岛市*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种通过去热原纯化降纤酶的方法。利用吸附的特性，在去热原的工序中，通过加入磷酸钾溶液、乙酸钙溶液吸附去除产品中的热原，从而达到去除热原的效果。技术方案是将经过蛇毒干粉溶解、亲和层析、离子交换层析、凝胶过滤纯化和冷冻干燥以得到的降纤酶干粉，进一步加入纯化水、乙醇、乙酸铵等溶解，并加入磷酸钾溶液、乙酸钙液吸附，后用氢氧化钠溶液调节pH 值搅拌后离心，上清液调pH 值后加乙醇离心后脱水、干燥得降纤酶精品。本发明与现有技术相比，优点在于在多次层析有效去除杂质、提高降纤酶的纯度的基础上，有效去除降纤酶中的热原，以获得纯度高、活性好、安全性高的降纤酶干粉，纯度可达98%以上，比活能够达到4000单位/mg以上，细菌内毒素小于0.01EU/U。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 通过 去热原 纯化 降纤酶 方法 | ||
【主权项】：
一种通过去热原纯化降纤酶的方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：（1）将降纤酶干粉用水溶解，依次加入乙醇、乙酸铵、磷酸钾溶液、乙酸钙溶液，搅拌，调节pH，搅拌，离心，取上清液；（2）调节上清液pH，搅拌，加入95%乙醇进行沉淀，虹吸，离心，并用无水乙醇洗涤沉淀脱水，离心，干燥，得去除热原的降纤酶精品。
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