[发明专利]一种油佐剂疫苗破乳后水相的纯化方法有效
申请号: | 201611124382.4 | 申请日: | 2016-12-08 |
公开(公告)号: | CN106769358B | 公开(公告)日: | 2020-01-24 |
发明(设计)人: | 俞爱敏;马贵军;石海芳 | 申请(专利权)人: | 申联生物医药(上海)股份有限公司 |
主分类号: | G01N1/34 | 分类号: | G01N1/34 |
代理公司: | 31236 上海汉声知识产权代理有限公司 | 代理人: | 郭国中 |
地址: | 200241 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明提供了一种油佐剂疫苗破乳后水相的纯化方法,包括以下步骤:将口蹄疫疫苗破乳后的抗原样品进行凝胶电泳;切取其中一个蛋白泳道进行染色确定目标蛋白的条带位置;再切取未染色凝胶上与经染色后的目标蛋白条带位置相同的凝胶进行样品处理;经处理后的胶块进行超声萃取,所得上清液进行真空冷冻干燥或者低温冷冻离心浓缩,即可。本发明通过将破乳后的抗原采用电泳进行分离纯化,提高了抗原的纯度,使纯化后的样品检测重复性良好,提高了检测结果的准确性,且可显著降低图谱信噪比,突出目标分子。且本发明在采用凝胶电泳纯化步骤中,特定采用部分染色的方式,可简化抗原处理步骤,同时增加抗原回收率,降低仪器维护成本。 | ||
搜索关键词: | 抗原 染色 破乳 目标蛋白 凝胶电泳 条带位置 切取 真空冷冻干燥 口蹄疫疫苗 油佐剂疫苗 电泳 超声萃取 蛋白泳道 低温冷冻 分离纯化 检测结果 抗原样品 离心浓缩 目标分子 染色凝胶 样品处理 样品检测 仪器维护 上清液 信噪比 胶块 凝胶 回收率 图谱 | ||
【主权项】:
1.一种油佐剂疫苗破乳后水相的纯化方法,其特征在于,由以下步骤组成:/nS1、将口蹄疫疫苗破乳后的抗原样品进行凝胶电泳;/nS2、切取其中一个蛋白泳道进行染色确定目标蛋白的条带位置;/nS3、再切取未染色凝胶上与经步骤S2染色后的目标蛋白条带位置相同的凝胶进行样品处理;/nS4、经处理后的胶块进行超声萃取,所得上清液进行真空冷冻干燥或者低温冷冻离心浓缩,即可;/n所述抗原样品为对经破乳处理后得到的水相溶液进行超滤、洗滤后,再进行冻干或浓缩所得;/n步骤S3中,所述样品处理具体包括以下步骤:/nA1、将未染色的含目标蛋白的胶块经ddH
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