[发明专利]一种封闭IL6R的用于缓解CRS的CAR-T转基因载体及其构建方法和应用有效
| 申请号： | 201611103319.2 | 申请日： | 2016-12-05 |
| 公开（公告）号： | CN108148863B | 公开（公告）日： | 2019-12-17 |
| 发明（设计）人： | 祁伟;俞磊;康立清;余宙 | 申请（专利权）人： | 上海优卡迪生物医药科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/867 | 分类号： | C12N15/867;C12N15/66;A61K48/00;A61K39/00;A61K35/17;A61P35/00 |
| 代理公司： | 31325 上海市汇业律师事务所 | 代理人： | 王函 |
| 地址： | 201201 上海市浦东新区张江*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种封闭IL6R的用于缓解CRS的CAR‑T转基因载体，包括：含氨苄青霉素抗性基因AmpR序列(SEQ ID NO.1)；原核复制子pUC Ori序列(SEQ ID NO.2)；病毒复制子SV40 Ori序列(SEQ ID NO.3)；eWPRE增强型土拨鼠乙肝病毒转录后调控元件(SEQ ID NO.11)；人EF1α启动子(SEQ ID NO.12)；用于慢病毒包装的慢病毒包装顺式元件；人IL6R的人源化单链抗体IL6RscFv1(SEQ ID NO.21)、IL6RscFv2(SEQ ID NO.22)、或IL6RscFv3(SEQ ID NO.23)；IRES核糖体结合序列(SEQ ID NO.25)；IL6信号肽(SEQ ID NO.26)；人源抗体Fc段(SEQ ID NO.27)；以及用于组成集识别、传递、启动于一体的二代CAR或三代CAR的嵌合抗原受体。此外，本发明还公开了该载体的构建方法及其在制备缓解CRS的药物中的应用。 | ||
| 搜索关键词： | 转基因载体 慢病毒 构建 缓解 氨苄青霉素抗性基因 核糖体结合序列 转录后调控元件 病毒复制子 单链抗体 嵌合抗原 人源抗体 顺式元件 乙肝病毒 复制子 启动子 人源化 信号肽 增强型 封闭 原核 制备 应用 传递 | ||
【主权项】：
1.一种封闭IL6R的用于缓解细胞因子释放综合症的CAR-T转基因载体，其特征在于，包括：/n用于目的菌株大量扩增的含氨苄青霉素抗性基因AmpR序列，如SEQ ID NO.1所示；/n用于质粒复制的原核复制子pUC Ori序列，如SEQ ID NO.2所示；/n用于增强真核细胞内的复制的病毒复制子SV40 Ori序列，如SEQ ID NO.3所示；/n用于增强转基因的表达效率的eWPRE增强型土拨鼠乙肝病毒转录后调控元件，如SEQID NO.11所示；/n用于嵌合抗原受体基因的真核转录的人EF1α启动子，如SEQ ID NO.12所示；/n用于慢病毒包装的慢病毒包装顺式元件；/n编码人IL6R的人源化单链抗体的核苷酸序列，所述人IL6R的人源化单链抗体为如SEQID NO.21所示的IL6RscFv1，或者如SEQ ID NO.22所示的IL6RscFv2，或者如SEQ ID NO.23所示的IL6RscFv3；/n用于共同转录表达蛋白质的IRES核糖体结合序列，如SEQ ID NO.25所示；/n编码IL6信号肽的核苷酸序列，如SEQ ID NO.26所示；/n编码人源抗体Fc段的核苷酸序列，如SEQ ID NO.27所示；/n以及编码用于组成集识别、传递、启动于一体的二代CAR或三代CAR的嵌合抗原受体的核苷酸序列。/n
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