[发明专利]检测角膜营养不良基因多态性位点的基因型的方法及其试剂盒有效
| 申请号： | 201610976247.6 | 申请日： | 2016-11-07 |
| 公开（公告）号： | CN108085375B | 公开（公告）日： | 2020-10-16 |
| 发明（设计）人： | 郭李平;赵相胜;杨文辉;陈路;其他发明人请求不公开姓名 | 申请（专利权）人： | 北京华大通瀛科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6858 | 分类号： | C12Q1/6858;C12Q1/6883 |
| 代理公司： | 北京弘权知识产权代理事务所(普通合伙) 11363 | 代理人： | 逯长明;许伟群 |
| 地址： | 100020 北京市朝*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种检测角膜营养不良基因多态性位点的基因型的方法，所述方法在相同的反应体系中，使用针对角膜营养不良多态性位点的基因野生型模板的增强型ARMS引物和针对突变型模板的增强型ARMS引物分别对同一份待测样本进行实时荧光定量PCR检测；然后根据样本用针对野生型模板的增强型ARMS引物进行荧光定量PCR检测的Ct野生型和针对突变型模板的增强型ARMS引物进行ARMS荧光定量PCR检测的Ct突变型以及Ct突变型与Ct野生型之间差值△Ct值，来判断多态性位点的型别从而确定角膜营养不良基因突变的基因型。本发明的方法操作简单和准确性高。 | ||
| 搜索关键词： | 检测 角膜 营养不良 基因 多态性 基因型 方法 及其 试剂盒 | ||
【主权项】：
1.检测角膜营养不良基因多态性位点的基因型的方法，其包括以下步骤：步骤1：在相同的反应体系中，使用针对角膜营养不良多态性位点的基因野生型模板的增强型ARMS引物和针对突变型模板的增强型ARMS引物分别对同一份待测样本进行实时荧光定量PCR检测；针对所述野生型模板的增强型ARMS引物的3`末端终止在待测位点处并且与野生型序列匹配，其中，在所述引物的3`末端第2-4位设置一个或多个错配碱基；针对所述突变型模板的增强型ARMS引物的3`末端终止在待测位点处并且与突变型序列匹配，其中，在所述引物的3`末端第2-4位设置一个或多个错配碱基；所述野生型模板的增强型ARMS引物和所述突变型模板的增强型ARMS引物共用上游或下游引物，所述共用上游或下游引物分别与所述针对野生型模板的增强型ARMS引物或所述针对突变型模板的增强型ARMS引物一起扩增一段包含待测基因突变位点的序列；和步骤2：根据样本用针对野生型模板的增强型ARMS引物进行荧光定量PCR检测的Ct野生型和针对突变型模板的增强型ARMS引物进行ARMS荧光定量PCR检测的Ct突变型以及Ct突变型与Ct野生型之间差值△Ct值，来判断多态性位点的型别从而确定角膜营养不良基因突变的基因型。
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