[发明专利]一种抗皮肤癣菌的特异性卵黄抗体及其制备方法和应用有效
| 申请号： | 201610786928.6 | 申请日： | 2016-08-31 |
| 公开（公告）号： | CN106397586B | 公开（公告）日： | 2019-12-06 |
| 发明（设计）人： | 赵肃清;胡青青;焦洛莹;夏娜娜;吕瑞;梁雨欣 | 申请（专利权）人： | 广东工业大学 |
| 主分类号： | C07K16/14 | 分类号： | C07K16/14;C07K16/02;A61K39/39;A61K9/06;A61K9/12;A61P31/10;A61K8/64;A61Q19/10;A61Q17/00;C12R1/645 |
| 代理公司： | 44329 广东广信君达律师事务所 | 代理人： | 张燕玲;杨晓松<国际申请>=<国际公布> |
| 地址： | 510062 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明属于生物技术领域，公开了一种抗皮肤癣菌的特异性卵黄抗体及其制备方法和应用。制备方法包括以下步骤：1)选取皮肤癣的两种主要致病菌，培养这两种皮肤癣菌，分别提取菌体的细胞壁蛋白；2)用步骤1)得到的蛋白制备抗原免疫母鸡，共计五次，得到鸡蛋，从鸡蛋中提取、纯化卵黄抗体；3)利用得到的IgY制备出抗皮肤癣菌的制剂。本发明利用皮肤癣致病菌的两种细胞壁蛋白，制备出抗皮肤癣菌的卵黄抗体具有较强特异性，能够有效的抑制皮肤癣菌，无毒副作用；本发明所述的方法易于大规模生产，成本低廉，工艺简单，得到的是产品是一种非常安全的抗皮肤癣疾病的制剂。 | ||
| 搜索关键词： | 抗皮肤癣菌 皮肤癣 制备 致病菌 细胞壁蛋白 卵黄抗体 皮肤癣菌 鸡蛋 特异性卵黄抗体 制备方法和应用 生物技术领域 无毒副作用 蛋白制备 抗原免疫 菌体 母鸡 疾病 安全 | ||
【主权项】：
1.一种抗皮肤癣菌的特异性卵黄抗体的制备方法，其特征在于包括以下步骤：/n（1）选取红色毛癣菌或须癣毛癣菌，先固体培养一周后采用液体培养；所述固体培养是采用SDA固体培养基；所述液体培养基是采用SDA液体培养基；/n（2）液体培养后进行冲洗和离心，得到的菌丝经过液氮研磨，超声破碎，离心得到细胞壁；利用冷碱抽提法提取真菌的细胞壁蛋白，离心得到上清液；将上清液透析后获得皮肤癣菌细胞壁蛋白抗原；所述液氮研磨的过程中加入10mM EDTA，10mM PMSF抑制蛋白酶；/n（3）选取20周龄产蛋母鸡；将皮肤癣菌细胞壁蛋白抗原用PBS缓冲液稀释成1mg/mL的皮肤癣菌细胞壁蛋白抗原溶液；将皮肤癣菌细胞壁蛋白抗原溶液与弗氏完全佐剂按照体积比1:1混合乳化，采用皮下多点注射的免疫方式对每只母鸡注射0.5mL；首次免疫两周后进行第一次加强免疫，用等体积的弗氏不完全佐剂与皮肤癣菌细胞壁蛋白抗原溶液混合乳化，采用皮下多点注射的免疫方式对每只母鸡注射0.5mL，以后每隔15天进行加强免疫一次，一共加强免疫4次，从第一次加强免疫开始收集免疫鸡蛋，并存放于4℃；/n（4）将获得的免疫鸡蛋用酒精消毒，破壳收集蛋黄，与冻存蒸馏水按照体积比为1:9混匀，离心获得水溶性成分，采用PEG6000进行沉淀获得卵黄抗体干粉，于-20℃保存。/n
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- 2016-08-31 - 2019-12-06 - C07K16/14
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