[发明专利]快速恒温检测假结核耶尔森氏菌的方法、引物及应用有效
| 申请号： | 201610767506.4 | 申请日： | 2016-08-30 |
| 公开（公告）号： | CN106434886B | 公开（公告）日： | 2020-01-21 |
| 发明（设计）人： | 曹永梅;李园园;李雪玲;韦朝春;贾犇;刘伟;陆长德;李亦学 | 申请（专利权）人： | 上海旺旺食品集团有限公司;上海产业技术研究院 |
| 主分类号： | C12Q1/689 | 分类号： | C12Q1/689;C12Q1/6844;C12Q1/04;C12N15/11 |
| 代理公司： | 31257 上海麦其知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人： | 董红曼 |
| 地址： | 201103 上*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种快速恒温检测假结核耶尔森氏菌的方法、引物组及试剂盒。所述方法为：从待测样品中提取基因组DNA；以所述基因组DNA为模板，以能扩增假结核耶尔森氏菌特异性序列的引物组为引物，在酶反应体系下进行恒温扩增反应；通过判断反应结果是否为阳性，确定待测样品中是否存在假结核耶尔森氏菌。本发明检测方法具有高灵敏度和高特异性，检测时间短，结果判定简单，操作便捷，成本低，具广泛应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 快速 恒温 检测 结核 耶尔森氏菌 方法 引物 应用 | ||
【主权项】：
1.一种非诊断目的的快速恒温检测假结核耶尔森氏菌的方法，其特征在于，包括以下步骤：/n(1)从待测样品中提取基因组DNA；/n(2)以所述基因组DNA为模板，以能扩增假结核耶尔森氏菌基因组特异性碱基序列的引物组作为引物，在酶反应体系下进行恒温扩增反应；/n(3)通过判断反应结果是否为阳性，确定待测样品中是否存在假结核耶尔森氏菌；/n其中，所述假结核耶尔森氏菌基因组特异性碱基序列为GI号为153946813的假结核耶尔森氏菌基因组的769086～769323bp位序列；/n其中，所述能扩增假结核耶尔森氏菌基因组特异性碱基序列的引物组为引物组A或引物组A’；/n引物组A：/n上游外引物F3_A：5’-GTCGTTACTGGCTGTGGATG-3’(SEQ ID NO：1)；/n下游外引物B3_A：5’-TTGCCAGCGTAAAGTCGG-3’(SEQ ID NO：2)；/n上游内引物FIP_A：5’-TGATTTCTCATTAGACGCCTGCCGTACCGATGGACAACAAACCC-3’(SEQ IDNO：3)；/n下游内引物BIP_A：5’-GGGGCCACGACCATTATCAAGCAACGCCACTTTCCAAGCG-3’(SEQ ID NO：4)；/n引物组A’：/n上游外引物F3_A：5’-GTCGTTACTGGCTGTGGATG-3’；/n下游外引物B3_A：5’-TTGCCAGCGTAAAGTCGG-3’；/n上游内引物FIP_A：5’-TGATTTCTCATTAGACGCCTGCCGTACCGATGGACAACAAACCC-3’；/n下游内引物BIP_A：5’-GGGGCCACGACCATTATCAAGCAACGCCACTTTCCAAGCG-3’；/n上游环引物LF_A：5’-TCCAAGAGTCCAACGTGGCAAA-3’(SEQ ID NO：9)。/n
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