[发明专利]利用纤维素内切酶和β-葡糖苷酶构建食品安全级载体及筛选培养基有效
| 申请号： | 201610597141.5 | 申请日： | 2016-07-27 |
| 公开（公告）号： | CN106191085B | 公开（公告）日： | 2019-10-25 |
| 发明（设计）人： | 薛栋升;梁龙元 | 申请（专利权）人： | 湖北工业大学 |
| 主分类号： | C12N15/63 | 分类号： | C12N15/63;C12N15/66 |
| 代理公司： | 武汉科皓知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 42222 | 代理人： | 常海涛 |
| 地址： | 430068 湖北*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明公开了利用纤维素内切酶和β‑葡糖苷酶构建食品安全级载体及筛选培养基，属于基因工程领域。一种食品安全级载体，以纤维素内切酶、β‑葡糖苷酶为筛选标记，含有纤维素内切酶编码基因、β‑葡糖苷酶编码基因，能表达纤维素内切酶和β‑葡糖苷酶。该载体的筛选培养基没有微生物可直接利用的碳源，包含羟甲基纤维素钠和栀子蓝。将纤维素内切酶编码基因、β‑葡糖苷酶编码基因克隆到载体上得到食品安全级载体。本发明利用纤维素内切酶以及β‑葡糖苷酶作为筛选标记酶，同时利用特殊的筛选培养基，能够快速准确的筛选出转化子；由于筛选标记不为抗生素，因而为食品安全级的载体。 | ||
| 搜索关键词： | 利用 纤维素 内切酶 葡糖 构建 食品安全 载体 筛选 培养基 | ||
【主权项】：
1.纤维素内切酶编码基因和β‑葡糖苷酶编码基因组合在构建食品安全级酵母载体中的应用，其特征在于：所述的食品安全级酵母载体的构建方法包括如下步骤：将SEQ ID NO.3所示序列、SEQ ID NO.4所示序列通过限制性内切酶及DNA连接酶构建到pPIC9K载体上；其中限制性内切酶为SnaBI、EcoR I和AvrII、NotI。
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