[发明专利]一种快速体内验证基因打靶靶点效率的方法在审
申请号: | 201610596433.7 | 申请日: | 2016-07-26 |
公开(公告)号: | CN106636298A | 公开(公告)日: | 2017-05-10 |
发明(设计)人: | 李阳;卢楠 | 申请(专利权)人: | 武汉伯远生物科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/06 | 分类号: | C12Q1/06 |
代理公司: | 上海精晟知识产权代理有限公司31253 | 代理人: | 冯子玲 |
地址: | 430079 湖北省武汉市东湖开发区高新大道666*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明提出了一种快速体内验证基因打靶靶点效率的方法,基于细胞内的DNA断裂后会激发同源片段发生重组修复来实现的,通过重组使得报告基因的活性恢复的方式验证靶点的活性。本方法只需构建一次插入了靶点的载体,然后通过有颜色的菌斑计数的方式快速评价靶点效率。本方法利用到大肠杆菌中天然重组系统,同源片段发生重组,将两个残缺的显色基因段重组成具有完整活性的蛋白,如果靶点具有活性将被切断,重组事件将被激活,显色基因被修复,从而产生有色菌斑,否则,为正常颜色的大肠杆菌菌落。该方法可以在大肠杆菌中快速实现候选靶点效率的验证,从而筛选出高效靶点,避免实验的失败。 | ||
搜索关键词: | 一种 快速 体内 验证 基因 打靶 效率 方法 | ||
【主权项】:
一种快速体内验证基因打靶靶点效率的方法,其特征在于,基于细胞内的DNA断裂后会激发同源片段发生重组修复来实现的,通过重组使得报告基因的活性恢复的方式验证靶点的活性。
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