[发明专利]一种消除过氧化氢提高雄甾二烯二酮产量的方法有效

专利信息
申请号: 201610576782.2 申请日: 2016-07-20
公开(公告)号: CN106191190B 公开(公告)日: 2019-06-18
发明(设计)人: 饶志明;邵明龙;张显;杨套伟;徐美娟 申请(专利权)人: 江南大学
主分类号: C12P33/02 分类号: C12P33/02;C12N15/53;C12N9/08;C12R1/125
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 214122 江苏*** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 一种消除过氧化氢提高雄甾二烯二酮产量的方法,属于基因工程和酶工程领域。本发明首先获得短小芽孢杆菌中过氧化氢酶(CAT)的基因扩增,然后利用pMA5‑ksdd质粒,实现了CAT与KSDD在模式菌株枯草芽孢杆菌168中的共表达。本发明构建以4‑AD为底物全细胞转化为方法的高产ADD的枯草芽孢杆菌工程菌株,对该菌株的酶活力及发酵性能进行研究发现3‑甾酮‑△1‑脱氢酶的活力较出发菌株有了明显提高,以0.3%(w/v)4‑AD为底物,全细胞转化10h,最终底物摩尔转化率几乎能达到100%,ADD的产量最终达到2.86g/L,比原始菌提高了约4.4倍。本发明为微生物一步发酵法生产ADD的工业化提供了有益的指导。
搜索关键词: 一种 消除 过氧化氢 提高 雄甾二烯二酮 产量 方法
【主权项】:
1.一种消除过氧化氢提高雄甾二烯二酮产量的方法,其特征在于,在雄甾二烯二酮生产菌中引入过氧化氢酶,过氧化氢酶基因序列如SEQ NO.1所示;利用过氧化氢酶分解3‑甾酮‑Δ1‑脱氢酶转化AD合成ADD过程中产生的H2O2,从而消除H2O2的积累对3‑甾酮‑Δ1‑脱氢酶的抑制作用。
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