[发明专利]用于检测转基因大豆GTS 40‑3‑2的LAMP引物组及检测方法

摘要

本发明涉及一种用于检测转基因大豆GTS 40‑3‑2的LAMP引物组及检测方法；是通过提取待检大豆品种的DNA，利用设计的四条特异性LAMP引物对模板DNA进行扩增，2％琼脂糖凝胶电泳检测，利用是否出现带状电泳条带可确定待检大豆是否为转基因大豆GTS40‑3‑2。本发明检测限为每体系模板DNA量为0.001ng。本发明具有简便快捷、特异性高、灵敏度高等优点，为检测转基因大豆GTS 40‑3‑2提供了新的LAMP检测引物组。

主权项

一种转基因大豆GTS40‑3‑2的LAMP快速检测方法，其特征在于步骤如下：a)设计引物，引物序列为：b)大豆基因组的提取：利用Cwbiotech DNA提取试剂盒提取大豆基因组；紫外分光光度计Nanodrop 2000检测DNA提取质量和浓度，选取OD260/OD280检测值为1.7‑1.9的DNA样品用于LAMP扩增，‑20℃保存备用；c)LAMP扩增：对步骤b)得到的基因组进行LAMP扩增，LAMP体系设置反应温度梯度为61℃、63℃和65℃；总体系25μL：其中引物FIP，BIP，F3，B3的比例为0.8μM:0.8μM:0.1μM:0.1μM或0.6μM:0.6μM:0.1μM:0.1μM；4mM MgSO₄,1.6mM dNTPs,0.8M betaine，1μL Bst DNA polymerase；扩增反应时间为40min或60min；d)分析：对步骤c)得到的扩增产物进行2％琼脂糖凝胶电泳；2％琼脂糖凝胶电泳出带状条带的为含有转基因大豆GTS 40‑3‑2的样品，空白的为不含有转基因大豆GTS 40‑3‑2的样品。