[发明专利]一种K88ac+产肠毒素大肠杆菌致弱株构建方法与应用

摘要

本发明提供了一种K88ac+产肠毒素大肠杆菌致弱株的构建方法，包括如下步骤：1)对K88ac+产肠毒素大肠杆菌肠毒素基因进行无痕点突变：对无抗生素抗性基因的K88ac+产肠毒素大肠杆菌的LT I基因上的TCT突变成AAA，使其对应编码的63号位的丝氨酸(S)突变成赖氨酸(K)；2)对K88ac+产肠毒素大肠杆菌肠毒素基因的敲除：在步骤1)的基础上，敲除K88ac+产肠毒素大肠杆菌的STⅡ基因，从而达到致弱K88ac+产肠毒素大肠杆菌的目的。使用本发明方法构建的致弱菌粘附性强、体内定植时间长、接种后能防止致病菌株的感染，可用于K88ac+ETEC引起的大肠杆菌病的生物预防。

主权项

一种K88ac⁺产肠毒素大肠杆菌致弱株的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：1)对K88ac⁺产肠毒素大肠杆菌肠毒素基因进行无痕点突变：将无抗生素抗性基因的K88ac⁺产肠毒素大肠杆菌的LT I基因上的TCT突变成AAA，使其对应编码的63号位的丝氨酸(S)突变成赖氨酸(K)；2)对K88ac⁺产肠毒素大肠杆菌肠毒素基因的敲除：在步骤1)的基础上，敲除K88ac⁺产肠毒素大肠杆菌的STⅡ基因，以达到致弱K88ac⁺产肠毒素大肠杆菌的目的。