[发明专利]生物补片的制备方法

摘要

本发明涉及2种生物补片，即肌腱和小肠浆膜补片的制备方法，提供了一种具备良好的生物力学特性和生物相容性的天然生物补片材料。方法为获取猪的肌腱和小肠浆膜为原料；脱细胞过程中全程使用包含一种保护肌腱和小肠浆膜支架结构的保护液；采用高静压技术预分离肌腱和小肠浆膜组织内的细胞；采用复合核酸酶方法消化残余细胞核；利用去垢剂脱除松散破碎细胞片；使用保护液进行漂洗。本发明在细胞核脱净的基础上，最大限度的降低了肌腱和小肠浆膜组织内的免疫原性，同时保留了组织的正常胶原纤维的三维结构及排列极性，适用于组织缺损修复、组织材料充填等。因其具有生物纤维材料的特性，还可广泛应用于其他生物医学领域。

主权项

一种脱细胞肌腱和小肠浆膜组织作为生物补片的制备方法，其特征在于包括以下步骤：(1)取猪的肌腱，清除肌腱表面的外膜和滑膜组织；取猪的空肠和回肠用水冲洗干净，钝性刮除小肠粘膜、粘膜下层和肌层，仅留下浆膜纤维层，用PBS漂洗干净；(2)肌腱和小肠浆膜纤维层脱细胞过程中全程使用一种保护肌腱和小肠浆膜结构的保护液；(3)采用高静压技术预分离肌腱和小肠浆膜组织内的细胞，通过物理的方法将肌腱和小肠浆膜结构内的细胞松解和破碎；(4)采用复合核酸酶方法消化残余细胞核；(5)利用去垢剂脱除松散破碎细胞片；(6)用保护液对肌腱和小肠浆膜进行漂洗；所述保护液的成分为：DMEM细胞培养基粉末5‑10g/L、L‑组氨酸盐酸盐2.87‑3.83g/L、硫酸软骨素25‑30g/L、低分子右旋糖酐20‑35g/L、羟丙基甲基纤维素2‑8g/L、别嘌呤醇0.5‑0.8g/L、HEPES缓冲液20‑25ml/L、盐酸地塞米松1‑2mg/L、还原型谷胱苷肽1.5‑3g/L以及左氧氟沙星0.1‑0.2g/L；所述高静压技术所采用的条件为200‑400MPa，高静压频率为2‑5次，每次为1～2分钟。