[发明专利]一种透明质酸接枝小分子硫酸软骨素复合材料的制备方法

摘要

本发明公开了一种透明质酸接枝小分子硫酸软骨素复合材料的制备方法，属于复合材料领域。本发明对鸡软骨分别进行碱处理、酶解处理、脱色处理，再进行提纯后通过透析和纳滤膜纳滤得纯小分子硫酸软骨素，将硫酸软骨素和透明质酸进行交联反应得到复合材料，本发明制备得到高纯度小分子硫酸软骨素，与透明质酸之间有具有非常好的生物相容性，将其和透明质酸进行交联反应，可利用透明质酸能渗入真皮，促进皮肤吸收等特性从而提高硫酸软骨素的生物活性和生物利用率，制备得到的复合材料可以广泛应用于药品、保健食品以及化妆品行业的原料。

主权项

一种透明质酸接枝小分子硫酸软骨素复合材料的制备方法，其特征在于具体制备步骤为：称取300～500g鸡软骨，按固液比1:8与水混合，混合后用质量分数25%氢氧化钠溶液调节pH为7.5～8.5，放入锅中沸腾煮制2～3h，取出冷却后剔除软骨上少量残留的肌肉、脂肪和其他结缔组织，放入烘箱中在50～60℃下干燥5～6h，干燥后粉碎、过筛得40～50目软骨颗粒；将上述软骨颗粒按质量比1:5与质量分数95%乙醇溶液混合，加入总质量0.5～0.7%碳酸氢钠粉末，搅拌混合后浸泡1～2h，向浸泡液中加入氯化钠固体，使氯化钠在浸泡液中的浓度为3～5%，继续浸泡2～3h后过滤取出得滤渣；将上述滤渣按固液比1:7溶于水中，调节pH为8～9后向其中加入滤渣质量3～5%胰蛋白酶和木瓜蛋白酶按质量比1:2的混合酶，并在50～60℃保温酶解3～4h，酶解后对酶解液加热至沸腾，灭酶处理2～3min，灭酶后过滤得到粗硫酸软骨素溶液；将上述粗硫酸软骨素溶液中加入溶液质量5～10%活性炭，在60～70℃下脱色40～50min，脱色后过滤，将滤液用质量分数5%盐酸调节pH至6～7，调节后加入溶液体积2～3倍质量分数90%乙醇溶液，静置待沉淀完全析出后过滤，得滤渣即为硫酸软骨素，最后将硫酸软骨素按质量比1:80溶解蒸馏水中，将溶液用截留分子量为5000～6000Da透析袋透析20～30h，将透析液用纳滤膜进行纳滤浓缩，脱除平均分子量小于2500Da硫酸软骨素和杂质，将得到的浓缩液喷雾干燥即可得到高纯度小分子硫酸软骨素；在装有搅拌器的三口烧瓶中，分别加入3～5g上述制备得到的硫酸软骨素、0.8～1.2g透明质酸和100～120mL蒸馏水，搅拌至固体溶解，向溶解液中加入总体积50～60%pH为7.5磷酸盐缓冲液，放入冰水浴中，在0～5℃下加入8～10mL质量分数30%双氧水和0.1～0.3g过氧化二异丙苯，搅拌交联15～25min后移入水浴中在40～60℃下继续交联1～2h，交联结束后停止反应，将反应物抽真空冷冻干燥，即可得到透明质酸接枝小分子硫酸软骨素复合材料。