[发明专利]一种磁性分子印迹微球的制备方法及在分离富集葫芦烷型三萜类化合物中的应用

摘要

一种磁性分子印迹微球的制备方法及在分离富集葫芦烷型三萜类化合物中的应用，包括Fe₃O₄纳米颗粒制备；Fe₃O₄@SiO₂复合颗粒制备；乙烯基修饰Fe₃O₄@SiO₂复合颗粒；表面印迹壳层制备。其应用：将磁性分子印迹微球与苦瓜藤提取液混合，振荡吸附后，用磁铁引出磁性分子印迹微球，最后加入甲醇‑乙酸溶液解吸附，再用磁铁引出磁性分子印迹微球，减压浓缩，完成TCD的富集。本发明磁性分子印迹微球将特异性结合位点集中到磁性颗粒表面，增大了比表面积，吸附量大且吸附速率很快，解吸附过程也只需加入少量洗脱剂，振荡，吸附的物质就会解吸到溶剂中，经外部磁场分离出印迹材料后，浓缩溶剂，即可得到TCD，简便而高效。

主权项

一种磁性分子印迹微球的制备方法，包括以下步骤：(1)Fe₃O₄纳米颗粒的制备：采用溶剂热法，将FeCl₃·6H₂O溶于乙二醇中，搅拌至溶液澄清，加入沉淀剂醋酸钠和静电稳定剂柠檬酸钠，高速搅拌至完全溶解后装入聚四氟乙烯水热反应釜，密封，马弗炉中加热反应；FeCl₃·6H₂O、醋酸钠和柠檬酸钠的质量比为1.5‑3:6:1；每1g FeCl₃·6H₂O加乙二醇60ml；搅拌速度为200‑400r/min；加热温度为200℃；反应时间为6‑14h；反应结束后自然冷却，再用无水乙醇、蒸馏水依次洗涤数遍，常温下真空干燥，得到Fe₃O₄纳米颗粒；(2)Fe₃O₄@SiO₂复合颗粒的制备：将上述Fe₃O₄纳米颗粒超声分散于异丙醇溶液中，加入质量百分比浓度为28％的氨水，机械搅拌，然后加入正硅酸乙酯，常温下高速机械搅拌，使正硅酸乙酯在碱性条件下发生水解、聚合反应，在Fe₃O₄纳米颗粒表面形成SiO₂层；Fe₃O₄纳米颗粒与反应溶剂的固液比(mg:ml)为1‑2:1；超声时间为10‑30min；每30ml反应溶剂加1ml浓氨水；每100mg的Fe₃O₄纳米颗粒加0.5ml正硅酸乙酯；搅拌速度为400r/min；反应时间为6‑12h；之后，用无水乙醇、蒸馏水依次洗涤至无杂质，常温下真空干燥，得到Fe₃O₄@SiO₂复合颗粒；(3)乙烯基修饰Fe₃O₄@SiO₂复合颗粒：将上述Fe₃O₄@SiO₂复合颗粒超声分散于乙醇溶液中，机械搅拌，得到溶液A；用盐酸调节乙醇溶液的pH至3.5‑4.5，然后加入MPS，使MPS在酸性条件下水解，得到溶液B；将溶液B缓慢滴加至溶液A中，常温下机械搅拌反应；Fe₃O₄@SiO₂复合颗粒与乙醇溶液的固液比(mg：ml)为1‑2.5:1；每10ml溶液加1‑2滴质量百分比浓度为36％的盐酸；每100mg的Fe₃O₄@SiO₂复合颗粒加0.25ml MPS；搅拌速度为400r/min；反应时间为24‑48h；之后，用无水乙醇、蒸馏水、乙腈依次洗涤数遍，得到乙烯基修饰的Fe₃O₄@SiO₂复合颗粒；(4)表面印迹壳层的制备：将TCD和丙烯酰胺溶解于二甲基亚砜中，然后加入乙腈溶液，超声脱气后冷藏静置12h，然后加入乙二醇二甲基丙烯酸酯和上述乙烯基修饰的Fe₃O₄@SiO₂复合颗粒，充氮气一段时间后，加入偶氮二异丁腈，使体系密封在氮气氛围中，充分搅拌，60℃热引发聚合反应；TCD、丙烯酰胺、乙二醇二甲基丙烯酸酯的摩尔比为1:4:10‑20；每1mmol TCD加2ml二甲基亚砜和280ml乙腈溶解；每1mmol的丙烯酰胺加0.3mmol的偶氮二异丁腈，充氮气的时间为30‑60min；聚合反应时间为24h；反应结束后在外磁场作用下分离磁性分子印迹微球，振荡洗脱模板分子，真空干燥。