[发明专利]一种利用沼液和造纸黑液制备木质素酶的方法

摘要

本发明公开了一种利用沼液和造纸黑液制备木质素酶的方法，属于木质素酶制备技术领域。本发明将玉米秸秆浸泡浸渍营养液后再在减压过滤后的沼液中浸泡，随后将浸泡物发酵，并在发酵过程中添加造纸黑液，待发酵结束，将发酵物加压后得到的挤压液和发酵液混合离心，最后将得到的离心液浓缩后喷雾干燥，从而得到利用沼液和造纸黑液制备木质素酶的方法。实例证明，本发明操作工艺简便，利用造纸黑液为原料，不仅降低了生产成本，减少了环境污染，而且在无需添加昂贵诱导物的情况下制得的木质素酶酶活性高达550U/mL，产量较多，可进行大规模生产应用。

主权项

一种利用沼液和造纸黑液制备木质素酶的方法，其特征在于具体制备步骤为：（1）取番薯去皮，将其切成边长为0.3～0.6cm的方块放入蒸锅中，向蒸锅中加入去皮后番薯质量60～65％的质量分数为0.9％的氯化钠溶液，搅拌均匀，再进行加热直至蒸锅内的液体沸腾，保持温度20～30min，自然冷却至室温，进行减压过滤，收集过滤液，得番薯营养液；（2）按重量份数计，取40～50份上述所得的番薯营养液、20～25份蛋白胨、15～20份酵母浸膏、8～12份羧甲基纤维素钠、3～6份氯化钙、1～4份七水硫酸铁及1～2份硫酸二氢钾，搅拌均匀，在120℃下灭菌25～30min，得浸渍营养液；（3）取玉米秸秆放入90℃的干燥箱中干燥10～15min，取出并浸泡于上述所得的浸渍营养液中，在30～35℃下浸泡过夜，按固液比1:3，再将浸泡后的秸秆取出放入经减压过滤后的沼液中浸泡1～2h，再将混合物移入发酵池内，密封发酵池，使用二氧化碳将发酵池内的空气排出；（4）待上述空气排出后，控制发酵池内的温度为35～40℃，以130r/min搅拌发酵10～12天，在发酵过程中向发酵池内加入造纸黑液，起始加入量为发酵池容积的1～3％，每隔9～10h，添加一次造纸黑液，每添加一次，造纸黑液的添加量比上一次添加量增加0.5～0.8％；（5）待上述发酵结束后，以10m³/h的速率向发酵池内通入无菌风，通入时间40～50min，在通风结束后，收集发酵液，将发酵物放入挤压机中进行挤压直至无液体流出，收集挤压液，将其与发酵液混合放入离心机中，在3000～5000r/min下分离10～15min，收集上清液；（6）把上述所得的上清液放入浓缩罐中浓缩，浓缩至原体积的30～40％，将所得的浓缩液放入喷雾干燥机中进行喷雾干燥，入口温度为110～120℃，出口温度为60～70℃，收集干燥物，即可得到木质素酶。