[发明专利]一种液相制备阿托西班的方法

摘要

本发明具体涉及一种液相制备阿托西班的方法。主要合成步骤为：(1)制备N端三氟乙酰基保护的天冬酰胺，然后依次连接4个氨基酸，再脱去三氟乙酰基得到五肽片段NH₂-Asn-Cys(Trt)-Pro-Orn(Boc)-Gly-NH₂；(2)合成片段四肽Mpa(Trt)-D-Tyr(Et)-Ile-Thr(tBu)-OH；(3)将五肽和四肽片段偶联，裂解得线性粗肽Mpa-D-Tyr(Et)-IIe-Thr-Asn-Cys-Pro-Orn-Gly-NH₂；(4)液相氧化，经纯化、冻干得阿托西班。该方法工序简单，分两段进行线性肽的合成；用三氟乙酰基保护天冬酰胺的氨基，使3种侧链保护基Trt、tBu、Boc用常规含三氟乙酸裂解试剂即可脱除，操作简便，解决了Boc策略液相合成方法中苄基脱除条件苛刻的问题；另外液相法制备阿托西班不需树脂、超量保护氨基酸和缩合剂、洗涤溶剂及特殊生产设备，成本低，易于实现大规模化生产。

主权项

一种液相制备阿托西班的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)、H‑Asn‑OH和三氟乙酸酐反应制备Tfa‑Asn‑OH；(2)、液相条件下，Tfa‑Asn‑OH和H‑Cys(Trt)‑OH、H‑Pro‑OH、H‑Orn(Boc)‑OH、H‑Gly‑NH₂依次偶联，合成片段Tfa‑Asn‑Cys(Trt)‑Pro‑Orn(Boc)‑Gly‑NH₂，脱去N端Tfa保护基，得五肽片段[5‑9]：NH₂‑Asn‑Cys(Trt)‑Pro‑Orn(Boc)‑Gly‑NH₂；(3)、液相条件下，Mpa(Trt)‑OH和H‑D‑Tyr(Et)‑OH、H‑Ile‑OH、H‑Thr(tBu)‑OH依次偶联，合成四肽片段[1‑4]：Mpa(Trt)‑D‑Tyr(Et)‑Ile‑Thr(tBu)‑OH；(4)、液相条件下四肽片段[1‑4]和五肽片段[5‑9]偶联得侧链保护基的全保护肽链：Mpa(Trt)‑D‑Tyr(Et)‑Ile‑Thr(tBu)‑Asn‑Cys(Trt)‑Pro‑Orn(Boc)‑Gly‑NH₂；(5)、将步骤(4)中肽链经裂解、沉降、分离得阿托西班线性粗肽：Mpa‑D‑Tyr(Et)‑IIe‑Thr‑Asn‑Cys‑Pro‑Orn‑Gly‑NH₂；(6)、将步骤(5)中的粗肽经液相氧化、制备液相纯化、浓缩冻干后得阿托西班精肽：c[Mpa‑D‑Tyr(Et)‑IIe‑Thr‑Asn‑Cys]‑Pro‑Orn‑Gly‑NH₂。