[发明专利]一种线粒体靶向的亚硝酰氢分子荧光探针及其制备方法和应用

摘要

本发明公开了一种线粒体靶向的亚硝酰氢分子荧光探针及其制备方法和应用，属于分析化学技术领域。该探针分子的结构式如式(Ⅰ)所示该探针分子系首次合成的针对细胞线粒体中的HNO分子进行检测的荧光探针，其合成方法相对比较容易，产率较高，且后处理过程相对简单。本发明实现了HNO分子探针的选择性快速检测，并且选择性好，抗其他分子干扰能力强。本发明是一种简单，快速，灵敏的HNO分子特异性检测试剂，在生物分子检测领域具有广阔的应用前景。

主权项

一种线粒体靶向的亚硝酰氢分子荧光探针，其特征在于，所述荧光探针的结构式如式(Ⅰ)所示：所述的亚硝酰氢分子荧光探针的制备方法包括以下步骤：1)将2′,4′‑二羟基‑2‑苯酮苯甲酸与间羟基苯基哌嗪在三氟乙酸中，氮气保护，90℃加热回流，反应24h，反应结束后减压旋干溶剂得粗产品，然后用硅胶柱分离得到化合物MHN‑1，结构式如下：2)将步骤1)所得化合物MHN‑1溶于乙腈中，加碳酸氢钠后再加入Fmoc‑Cl，氮气保护，室温反应3h，反应完全后萃取、干燥、旋干并用硅胶柱分离得到化合物MHN‑2，所述MHN‑2和Fmoc‑Cl的结构式分别如下：3)将化合物二苯基磷苯甲酸溶于二氯甲烷中，加入二环己基碳二亚胺和4‑二甲氨基吡啶后在室温下搅拌20min后加入化合物MHN‑2，在室温下搅拌8h，反应完全后萃取、干燥、旋干并用硅胶柱分离得到化合物MHN‑3，结构式如下：4)将化合物MHN‑3溶于乙腈，然后逐滴加入15％的哌啶，在室温下搅拌30min，反应完全后，加入水淬灭反应，然后用二氯甲烷分两次萃取，依次用水、饱和食盐水洗涤后干燥、旋干溶剂，并用硅胶柱进行分离得到化合物MHN‑4，结构式如下：5)将化合物MHN‑4溶于DMF中，加入K2CO3后在室温下搅拌10min，加入三苯基膦丁基溴后在室温下反应过夜，用TLC板检测反应，反应完全后分离提纯得到目标探针化合物Mito‑HN。