[发明专利]快速鉴定有棱丝瓜‘雅绿6号’杂交种子纯度的核苷酸引物组合及检测方法

摘要

本发明公开了一种快速鉴定有棱丝瓜‘雅绿6号’杂交种子纯度的核苷酸引物组合及检测方法。本发明率先在丝瓜中利用分子标记鉴定杂交种子的纯度，能够快速、简便、经济、高效、准确的对有棱丝瓜‘雅绿6号’的杂交种子进行纯度鉴定，同时采用两对引物进行鉴定，能够起到相互印证的作用，避免操作失误引起的误判，大大提高种子纯度鉴定的准确性。与传统的田间形态鉴定相比，该方法从DNA提取到跑胶鉴定结束，仅需1‑3天，操作简便，节省人工，不需要占用土地，鉴定结果更加准确可靠，极大的提高了鉴定效率，大幅缩减鉴定费用。本发明在‘雅绿6号’制种、繁重和销售企业中具有极大的应用和推广价值。

主权项

1.一种用于快速鉴定有棱丝瓜‘雅绿 6 号’杂交种子纯度的核苷酸引物组，其为引物组 1和引物组 2，其中：引物组 1 在有棱丝瓜‘雅绿 6 号’杂交种子的 PCR 产物中可产生含有如 SEQ ID NO.5 所示核苷酸序列的母本特异性标记条带，以及含有如 SEQ ID NO.6 所示核苷酸序列的父本特异性标记条带；引物组 2 在有棱丝瓜‘雅绿 6 号’杂交种子的 PCR 产物中可产生含有如 SEQ ID NO.7 所示核苷酸序列的母本特异性标记条带，以及含有如 SEQ ID NO.8 所示核苷酸序列的父本特异性标记条带；所述引物组 1 在有棱丝瓜‘雅绿 6 号’杂交种子的 PCR 产物中可产生 146 bp 的母本特异性标记条带，如 SEQ ID NO.5 所示，以及 152 bp 的父本特异性标记条带，如 SEQ ID NO.6 所示；所述引物组 2 在有棱丝瓜‘雅绿 6 号’杂交种子的 PCR 产物中可产生 216 bp 的母本特异性标记条带，如 SEQ ID NO.7 所示，以及 207bp 的父本特异性标记条带，如 SEQ ID NO.8 所示；所述引物组 1 的序列如下所述：SGJ750‑F：5’‑GATGGCGATAGGGAATCAAA‑3’ （SEQ ID NO:1），SGJ750‑R：5’‑CCATTGCCACAGAGTCTCAC‑3’（SEQ ID NO:2）；所述引物组 2 的序列如下所示：SGJ760‑F：5’‑CGCTTCTCTCGCTAGTCTTCA‑3’（SEQ ID NO:3），SGJ760‑R：5’‑TCATCGCTCTCCCTTTCTCT‑3’ （SEQ ID NO:4）。