[发明专利]酿酒酵母基因组定点突变的方法在审
申请号: | 201610088284.3 | 申请日: | 2016-02-17 |
公开(公告)号: | CN105624187A | 公开(公告)日: | 2016-06-01 |
发明(设计)人: | 元英进;谢泽雄;李炳志 | 申请(专利权)人: | 天津大学 |
主分类号: | C12N15/81 | 分类号: | C12N15/81;C12N1/19;C12R1/865 |
代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人: | 赵青朵 |
地址: | 300072 天津市*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | 本发明涉及微生物领域,特别涉及酿酒酵母基因组定点突变的方法。本发明利用CRISPR/Cas9技术修复酿酒酵母基因组上待修复的单碱基突变位点。如果该突变位点位于PAM序列(NGG)中或者PAM序列前11bp内,则可利用guide RNA引导Cas9蛋白在待修复位点附近发挥作用,将酿酒酵母基因组进行切割处双链切口,从而实现供体DNA的高效重组。本发明对比已有成果具有以下有益效果:高效、快速实现酿酒酵母基因组位点的突变;无需向酿酒酵母基因组整合筛选标记。 | ||
搜索关键词: | 酿酒 酵母 基因组 定点 突变 方法 | ||
【主权项】:
一种酿酒酵母基因组定点突变的方法,其特征在于,包括如下步骤:步骤1:选择突变位点的靶位点;步骤2:酵母转化,引入酿酒酵母基因组点突变;步骤3:对点突变进行验证。
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