[发明专利]一种用于荧光定量PCR检测15型HPV的特异性引物和探针的组合以及试剂盒

摘要

本发明提出一种用于荧光定量PCR检测15型HPV的特异性引物和探针的组合以及试剂盒。本发明针对HPV基因L1区设计的3条上游和2条下游引物组和15条特异性Taqman探针组，相应的试剂盒在特定PCR条件下可以在同一管中快速简便的检测包括16，18，31，33，35，39，45，51，52，56，58，59，66，68，73等15种高危型HPV并对16、18型HPV进行分型，降低了成本，并且无需开盖操作，防止了污染发生，同时利用人肌动蛋白基因作为内标基因，减少了假阴性的发生。

主权项

一种用于荧光定量PCR检测15型HPV的特异性引物和探针的组合，其特征在于，包括3条上游引物、2条下游引物和分别针对15种高危型HPV DNA的Taqman探针，具体碱基序列如下：上游引物1 5’‑TTTGTTACYGTTGTKGATACTACYAG‑3’上游引物2 5’‑TTTGTTACWGTKGTRGATACCACTCG‑3’上游引物3 5’‑TTTGTTACWGTKGTRGATACCACTCG‑3’下游引物1 5’‑TGAAAAAYAAACTGTAARTCATAYTCTTC‑3’下游引物2 5’‑TGAAAWATAAAYTGTAAATCAWATTCCTC‑3’HPV16探针 5’‑TATGTCTTTATGTGCTGCCATATCTACTTCAGAA‑3’HPV18探针 5’‑CTTCTACACAGTCTCCTGTACCTGGGCA‑3’HPV31探针 5’‑ACCAATATGTCTGTGTGTGCTGCAATTG‑3’HPV33探针 5’‑TGACTTTATGCACACAAGTAACTAGTGACAGTACA‑3’HPV35探针 5’‑ATGTCTGTGTGTTCTGCTGTGTCTTCTAGTGA‑3’HPV39探针 5’‑TCTTCCATACCTTCTACATATGATCCTTCTAAGTTT‑3’HPV45探针 5’‑TTATGTGCCTCTACACAAAATCCTGTGCC‑3’HPV51探针 5’‑TATTAGCACTGCCACTGCTGCGGTT‑3’HPV52探针 5’‑ACATGACTTTATGTGCTGAGGTTAAAAAGGAA‑3’HPV56探针 5’‑CTACAGAACAGTTAAGTAAATATGATGCACGAAAA‑3’HPV58探针 5’‑ATATGACATTATGCACTGAAGTAACTAAGGAAGGT‑3’HPV59探针 5’‑CTTTCTGTGTGTGCTTCTACTACTTCTTCTATTCC‑3’HPV66探针 5’‑CACATTAACTAAATATGATGCACGTGAAATCAA‑3’HPV68探针 5’‑CATTGTCCACTACTACWGACTCTACTGTACCAGC‑3’HPV73探针 5’‑ACAGGCTAGTAGCTCTACTACAACGTATGCCA‑3’。