[发明专利]一种用于单细胞电泳芯片的双激光诱导荧光多色检测器

摘要

本发明公开了一种用于单细胞电泳芯片的双激光诱导荧光多色检测器，该检测器由激光激发模块、荧光收集与探测模块、显微成像模块、信号采集与处理模块和微流控芯片检测平台组成，具有在微流控芯片上进行双激光诱导荧光多色检测、正常显微观察和双激光聚焦光斑与检测区对准观察等功能。利用本发明可以实现对“不同吸光、不同荧光特性”的荧光物质、特别是微流控芯片电泳分离的单细胞内“不同激发、不同发射”荧光标记多组分活性小分子的同时检测与定量，极大拓展激光诱导荧光检测、微流控芯片、单细胞分析及活性小分子检测等相关研究与应用的空间。

主权项

1.一种用于单细胞电泳芯片的双激光诱导荧光多色检测器，包括激光激发模块、荧光收集与探测模块、显微成像模块、信号采集与处理模块和微流控芯片检测平台；其特征在于：所述的激光激发模块：第一固定波长激光器出射的水平光路上同轴地设有第一全反射镜，第一全反射镜的反射面与水平光路的夹角为45度，且第一全反射镜与二向色激光合束器平行；第二固定波长激光器出射的水平光路上同轴地设有二向色激光合束器、扩束器和多边缘二向色分束器，多边缘二向色分束器的反射面与水平光路的夹角为135度；所述多边缘二向色分束器的反射光路上同轴地设有第一物镜，在第一物镜的上方设有供微流控芯片放置与固定的微流控芯片检测平台；在所述第一物镜的焦平面位置，第一物镜的轴与微流控芯片分离通道中的样品液流的轴垂直且相交于检测区，以激发样品产生荧光；所述的荧光收集与探测模块：第一透镜、第二透镜和第三透镜的轴分别与第一物镜的轴垂直并相交，交点位于多边缘二向色分束器的下方，且交点处分别设置有与多边缘二向色分束器平行的第一单边缘二向色分束器、第二单边缘二向色分束器和第二全反射镜；所述第一单边缘二向色分束器将经第一物镜收集、多边缘二向色分束器透过的检测区发出的荧光被分成两路，波长小于575nm的绿光反射进入同轴设置的第一透镜、第一可调光阑、第一带通滤波器和第一光电倍增管，而波长大于575nm的透射光经过第二单边缘二向色分束器分成红光和近红外两个光路，反射的红光进入同轴设置的第二透镜、第二可调光阑、第二带通滤波器和第二光电倍增管，而透射的近红外光经第二全反射镜反射，进入同轴设置的第三透镜、第三可调光阑、第三带通滤波器和第三光电倍增管；所述的显微成像模块：白光辅助照明光源出射的水平光路上同轴地设有分光镜，分光镜的反射面与水平光路的夹角为45度，分光镜的反射光路上设置有第二物镜，第二物镜的轴与镜筒的轴垂直并相交，交点处设置有第三全反射镜，第三全反射镜与分光镜平行且位于分光镜的上方，第三全反射镜的反射光路上同轴地设有中性衰减滤光片、镜筒和CCD图像传感器；所述的信号采集与处理模块：包括三通道数据采集卡和程序软件，其中，所述三通道数据采集卡的输入端与第一光电倍增管、第二光电倍增管、第三光电倍增管的输出端并联连接；所述微流控芯片检测平台被水平固定于三维移动平台上，通过调节三维移动平台实现微流控芯片与第一物镜和第二物镜的焦平面的相对位置的任意匹配；所述显微成像模块被固定于三维行走工作平台上，通过调节三维行走工作平台和切换不同光源的开关，能够使第二物镜的焦平面与微流控芯片通道内部或第一物镜焦平面的相对位置的任意匹配。