[发明专利]辣椒叶片中类胡萝卜素组分的提取及其含量的定量检测方法

摘要

本发明提供辣椒叶片中类胡萝卜素组分的提取方法，步骤如下（1）在新鲜辣椒叶片中加入液氮充分研磨至粉末状；（2）皂化在辣椒叶片中加入质量浓度为15‑30%的KOH‑甲醇皂化液，于40‑80℃皂化20‑60min；（3）提取在步骤（2）制备的皂化的辣椒叶片中加入丙酮‑乙酸乙酯的混合提取溶剂进行超声提取，得到类胡萝卜素粗提液；（4）将步骤（3）得到的类胡萝卜素粗提液进行后处理，得到含有类胡萝卜素的溶液。本发明还提供类胡萝卜组分的高效液相色谱检测方法，能够将辣椒叶片中10种类胡萝卜素很好的分离，并且能够同时定量测定10种类胡萝卜素的含量。

主权项

辣椒叶片中类胡萝卜素含量的定量检测方法，其特征在于：步骤如下：（1）提取辣椒叶片中类胡萝卜素；所述提取方法为：A、液氮研磨：在新鲜辣椒叶片中加入液氮充分研磨至粉末状；B、皂化：在步骤A中加入质量浓度为15‑30%的KOH‑甲醇皂化液，于40‑80℃皂化20‑60min；C、提取：在步骤B制备的皂化的辣椒叶片中加入丙酮‑乙酸乙酯的混合提取溶剂进行超声提取，得到类胡萝卜素粗提液；所述辣椒叶片与混合提取溶剂的比值为1g:(2‑8)ml；所述混合提取溶剂中丙酮与乙酸乙酯的体积比为1:2；D、将步骤C得到的类胡萝卜素粗提液进行后处理，得到含有类胡萝卜素的溶液；（2）用丙酮将得到的含有类胡萝卜素的溶液定容至10mL，过0.22μm有机滤膜，得到辣椒叶片类胡萝卜素待测样品；所述丙酮为色谱纯；（3）依据下述色谱条件对待测样品进行高效液相色谱测试：色谱柱为Welch Ultimate C30高效液相色谱柱，规格为250mm×4.6mm，填料直径为5μm；流动相的柱流速1.0mL/min，柱温30℃，检测波长为450nm；流动相组分为：A：乙腈，B：水，C：甲基叔丁基醚和甲醇的混合液，其中，甲基叔丁基醚与甲醇体积比为1:1，D：乙酸乙酯；流动相梯度洗脱程序为：0min～6min：B由0线性增加到10%，C保持0，D由0线性增加到10%；6min～12min：B由10%线性增加到15%，C保持0，D由10%线性增加到20%；12min～20min：B由15%线性递减到0，C保持0，D由20%线性递减到10%；20min～22min：B由0线性增加到5%，C由0线性增加到40%，D由 10%线性递减到5%；22min～30min：B由5%线性递减到0，C由40%线性增加到50%，D由5%线性增加到20%；30min～35min：A线性增加到100%；（4）根据各单个标准品溶液中类胡萝卜素组分的保留时间，确定辣椒叶片类胡萝卜素待测样品中10种类胡萝卜素的保留时间，进一步确定各种类胡萝卜素组分的峰面积，将各种类胡萝卜素组分的峰面积分别代入相应的线性回归方程中，得到辣椒叶片中相应组分的类胡萝卜素的含量。