[发明专利]定量分析微塑料在哺乳动物体内富集和分布的方法

摘要

本发明提供一种定量分析微塑料在哺乳动物体内富集和分布的方法，该方法是一种基于荧光标记技术来定量分析微塑料在哺乳动物体内富集和分布规律的方法，属于环境健康风险评价领域。其步骤为合成具有荧光标记的微塑料；选取模式动物进行灌胃实验；解剖模式动物采集肝脏，肾脏和小肠组织等主要器官；冷冻干燥组织；取一定质量的冻干组织，采取湿发消解；配置不同浓度梯度的荧光微塑料悬浊溶液，根据荧光光谱仪测定的荧光值得到标准曲线；分别测定各个组织样品消解液的荧光值，依据标准曲线得到单位组织样品中微塑料含量；最终确定进入组织的微塑料含量。通过本方法可以准确定量微塑料在哺乳动物组织器官中的富集和分布。

主权项

一种定量分析微塑料在哺乳动物体内富集和分布的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：(1)荧光微塑料颗粒的制备：首先配制10‑20mL的三氯甲烷与异丙醇1：1体积比的混合溶剂，然后称取0.1‑0.2g交联聚苯乙烯微球和5‑10mg的4‑氯‑7‑硝基苯并‑2‑氧杂‑1,3‑二唑加入上述混合溶剂中，并在超声和氮气保护条件下分散溶解，充分溶解后的混合液体进行干燥，然后用50‑70%乙醇洗涤以去除多余荧光染料，接着离心回收荧光微塑料，制备出带绿色荧光的PS微球；(2)哺乳动物暴露实验：选择上述合成的荧光标记微塑料作为受试样品，选取模式哺乳动物进行灌胃染毒实验，以健康哺乳动物作为空白对照组；(3)样品采集：荧光微塑料染毒周期结束以后，受试动物解剖，采集组织样品；(4)冷冻干燥组织样品：使用冷冻干燥仪，分别冷冻干燥空白对照组和染毒组的组织样品至恒重；(5)湿法消解样品：称取一定量的冻干组织样品，采用湿法消解组织样品；(6)荧光定量检测微塑料含量：采用空白对照组动物的组织消解液，加入已知含量的荧光微塑料，制备不同浓度梯度的悬浊液，在设定的最大激发波长和最大发射波长下，用荧光光谱仪检测其荧光值，以荧光强度和对应的微塑料浓度绘制出标准曲线，然后检测染毒组组织消解液的荧光值，根据标准曲线确定组织液微塑料浓度，并换算出各组织中微塑料含量。