[发明专利]一种菊粉内切酶的制备方法及其应用在审
| 申请号： | 201610017792.2 | 申请日： | 2016-01-12 |
| 公开（公告）号： | CN105505899A | 公开（公告）日： | 2016-04-20 |
| 发明（设计）人： | 姜岷;王培培;戴仲雪;马江锋;吴昊 | 申请（专利权）人： | 南京工业大学 |
| 主分类号： | C12N9/24 | 分类号： | C12N9/24;C12N15/70 |
| 代理公司： | 江苏致邦律师事务所 32230 | 代理人： | 徐蓓 |
| 地址： | 211816 江苏省南京市浦口*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种菊粉内切酶的制备方法及其应用，以Aspergillus ficuum ATCC 16882的endo-inu2基因为来源序列，通过基因工程技术对基因序列进行优化，将优化后的编码菊粉内切酶的基因序列克隆到pET-28a(+)载体上，构建出高效分泌表达菊粉内切酶的重组大肠杆菌Escherichia coli BL21pET28a-pelB-NSinu2。利用该重组大肠杆菌作为发酵菌株，实现了对菊粉内切酶的高效分泌表达，最后对制备得到的菊粉内切酶进行纯化并成功用于水解菊粉制备低聚果糖。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 菊粉 内切酶 制备 方法 及其 应用 | ||
【主权项】：
一种菊粉内切酶的制备方法，其特征在于，该制备方法包括如下步骤：步骤一，构建大肠杆菌工程菌：将经过基因工程技术优化后的编码菊粉内切酶的基因序列pelB‑NSinu2，克隆到pET‑28a(+)载体，构建出pET28a‑pelB‑NSinu2质粒，导入大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)中，构建出分泌表达菊粉内切酶的重组大肠杆菌E.coli BL21pET28a‑pelB‑NSinu2；步骤二，利用步骤一获得的大肠杆菌工程菌进行发酵，实现菊粉内切酶的分泌表达；步骤三，提取发酵上清液，对该上清液进行纯化得到菊粉内切酶液。
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