[发明专利]一种分离提纯必特螺旋霉素的工艺方法

摘要

本发明涉及一种分离提纯必特螺旋霉素的工艺方法，步骤为：(1)含有必特螺旋霉素的酯提取液，经三级逆流洗涤，得到洗后酯溶液；(2)用磷酸盐溶液第一次反萃洗后酯溶液，得含有必特螺旋霉素的一次水提液；(3)用酯萃取一次水提液，得到浓缩必特螺旋霉素的酯萃取液；(4)用磷酸盐溶液第二次反萃酯萃取液，得含有必特螺旋霉素的二次水提液；(5)加入乙醇，滴加碱液结晶，得到必特螺旋霉素成品。与现有技术相比，本发明采用三级逆流萃取洗涤和变相比的多次溶媒萃取法，达到去除较强极性杂质而富集有效组分的目的；并通过加入乙醇调节结晶体系极性和采用低浓度碱液调节结晶液pH的方法，有效去除组分间杂质并富集有效组分。

主权项

1.一种分离提纯必特螺旋霉素的工艺方法，其特征在于，该工艺方法包括以下步骤：(1)三级逆流洗涤：用磷酸盐溶液三级逆流洗涤含有必特螺旋霉素的酯提取液，得到含有必特螺旋霉素的洗后酯溶液；(2)第一次反萃：用磷酸盐溶液反萃含有必特螺旋霉素的洗后酯溶液，静置分液，得含有必特螺旋霉素的一次水提液；(3)酯萃取：用酯萃取含有必特螺旋霉素的一次水提液，静置分液，得到浓缩必特螺旋霉素的酯萃取液；(4)第二次反萃：用磷酸盐溶液反萃浓缩必特螺旋霉素的酯萃取液，静置分液，得含有必特螺旋霉素的二次水提液；(5)结晶：向含有必特螺旋霉素的二次水提液中，加入乙醇，滴加碱液结晶，得到必特螺旋霉素成品；用酯提取必特螺旋霉素发酵液得到含有必特螺旋霉素的酯提取液，含有必特螺旋霉素的酯提取液效价为7000‑11000u/ml；步骤(5)所述的结晶步骤中，首先调节含有必特螺旋霉素的二次水提液的pH至4.5‑5.5，向含有必特螺旋霉素的二次水提液中持续鼓入空气，以去除微量酯，得到必特螺旋霉素的结晶液，然后向必特螺旋霉素的结晶液中加入乙醇，向结晶液中加入乙醇的量为结晶液质量的6％‑10％，滴加碱液结晶，得到必特螺旋霉素成品；结晶过程中首先使用0.8～1.2mol/l的碱液滴定结晶液至刚出现沉淀，然后改用浓度为0.05～0.15mol/l的碱液继续滴加结晶，控制结晶终点pH值为7.5‑8.0。