[发明专利]一种简易有效的气传植物真菌病害孢子的单孢分离法

摘要

本发明公开了一种简易有效的气传植物真菌病害孢子的单孢分离法，从孢子捕捉到分离包括以下步骤：1）制备孢子捕捉工具；2）利用涂有凡士林的玻片捕捉孢子；3）显微镜下对玻片上的可见杂物除杂；4）利用玻璃涂布器从玻片上粘取白色凡士林涂布于4%水琼脂上，反复操作多次稀释孢子浓度；5）在显微镜下挑取单孢子，实现单孢分离；本发明采用玻片涂凡士林捕捉空气中的孢子，然后从玻片上分离气传孢子，将空气中捕捉到的气传孢子通过涂布稀释法从玻片上分离下来；避免了细菌污染、便于操作、技术要求低、分离纯度高、技术简便、成本低，提供了一种很好的气传真菌孢子分离方法。

主权项

一种简易有效的气传植物真菌病害孢子的单孢分离法，其特征在于，从孢子捕捉到分离包括以下步骤：1）制备孢子捕捉工具：用竹子或者木头做一个十字形的伞形支架，在十字支架的横架上设置4个摆设玻片的卡槽，卡槽迎风方向倾斜摆设，卡槽高度与寄主植物高度持平；2）捕捉孢子：将涂上凡士林的玻片放置于支架上的卡槽内，孢子因重力或风的作用沉降于玻片上，收集玻片置于干净容器内带回实验室备用；3）除杂：将带回实验室的玻片置于显微镜下观察，镜头下观察到各种杂菌孢子和杂质，包括镰刀菌、青霉菌孢子、昆虫及杂物，用挑针挑除肉眼可见的昆虫及杂质；4）涂布分离：用玻璃涂布器从玻片上粘取白色凡士林涂布于水琼脂上，将第一个涂有孢子的水琼脂上的凡士林再涂到下一个水琼脂上，由于孢子密度较大，重复涂布多次稀释至在光学显微镜10×物镜下，一个视野范围内分布3‑5个孢子为止；5）取样：在显微镜下挑取单孢子，实现单孢分离。