[发明专利]膜蛋白在具有细胞壁的真核细胞中的定向进化在审

专利信息
申请号: 201580076651.1 申请日: 2015-12-21
公开(公告)号: CN107624132A 公开(公告)日: 2018-01-23
发明(设计)人: M·许茨;A·普鲁克图恩 申请(专利权)人: 苏黎士大学
主分类号: C12N15/10 分类号: C12N15/10;G01N33/566
代理公司: 北京泛华伟业知识产权代理有限公司11280 代理人: 郭广迅,李渤
地址: 瑞士*** 国省代码: 暂无信息
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摘要: 发明涉及用于从文库选择表达的序列的方法,其包括以下步骤多个包含细胞壁的真核细胞中的每个包含文库的核酸序列成员,其在所述真核细胞中表达为靶膜蛋白。所述细胞的细胞壁是透化的。所述透化的细胞使用能够结合到所述靶膜蛋白的配体标记。所述配体带有可检测的标记。选择所述标记的细胞的子集作为存在的可检测标记的函数。最终,在分离步骤中,从所述选择的细胞分离表达的核酸序列。
搜索关键词: 膜蛋白 具有 细胞壁 真核细胞 中的 定向 进化
【主权项】:
一种用于从表达的核酸序列的文库选择序列的方法,其包括以下步骤:a)提供多个包含细胞壁的真核细胞,其中所述真核细胞中的每个包含所述文库的核酸序列成员,并且所述核酸序列成员被表达为在所述多个真核细胞中的靶膜蛋白,b)在透化步骤中,透化所述多个真核细胞的所述细胞壁,产生多个透化的细胞,c)在标记步骤中,使所述多个透化的细胞与能够结合到所述靶膜蛋白的配体接触,其中所述配体包括可检测标记,产生多个标记的细胞,d)在洗涤步骤中,洗涤所述多个标记的细胞,e)在选择步骤中,选择所述多个标记的细胞的子集作为存在于所述多个标记的细胞中的可检测标记的函数,产生选择的细胞,和f)在分离步骤中,从所述选择的细胞分离表达的核酸序列。
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